应用抑制性消减杂交技术筛选脂肪细胞分化相关基因

R781; 目的:利用脂肪分化细胞模型筛选与脂肪细胞分化相关的差异性表达基因.方法:采用抑制性消减杂交技术,以诱导分化后的人前体脂肪细胞系SW872总RNA为Tester,诱导分化前的人前体脂肪细胞系SW872为Driver,将消减杂交获得的DNA片段与pGM-T载体连接,构建cDNA文库后,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆.将获得的阳性克隆插入片段进行测序分析,并与GenBank数据库进行同源性分析,获得差异性表达基因.结果:扩增消减cDNA文库获得135个白色克隆,随机挑选64个进行测序,共获得34个阳性克隆基因.结论:本研究成功构建了脂肪细胞分化差异性表达基因的消减cDNA文库,筛选出...

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Published in浙江大学学报（医学版） Vol. 41; no. 3; pp. 267 - 273
Main Authors 易晓青, 肖延风, 尹春燕, 徐尔迪
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 西安交通大学第二附属医院儿科,陕西西安,710004 2012
Subjects
DNA,互补/遗传学
细胞,培养的
基因文库
克隆,分子
肥胖症
脂细胞/遗传学
杂交,遗传
细胞分化/遗传学
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ISSN1008-9292
DOI10.3785/j.issn.1008-9292.2012.03.007

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Summary:R781; 目的:利用脂肪分化细胞模型筛选与脂肪细胞分化相关的差异性表达基因.方法:采用抑制性消减杂交技术,以诱导分化后的人前体脂肪细胞系SW872总RNA为Tester,诱导分化前的人前体脂肪细胞系SW872为Driver,将消减杂交获得的DNA片段与pGM-T载体连接,构建cDNA文库后,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆.将获得的阳性克隆插入片段进行测序分析,并与GenBank数据库进行同源性分析,获得差异性表达基因.结果:扩增消减cDNA文库获得135个白色克隆,随机挑选64个进行测序,共获得34个阳性克隆基因.结论:本研究成功构建了脂肪细胞分化差异性表达基因的消减cDNA文库,筛选出了与脂肪细胞分化相关的差异表达基因.
ISSN:1008-9292
DOI:10.3785/j.issn.1008-9292.2012.03.007