17-丙烯胺-17去甲氧格尔德霉素对大鼠嗜铬细胞瘤细胞凋亡及血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨热休克蛋白90（HSP90）抑制剂17-丙烯胺-17去甲氧格尔德霉素（17-AAG）对大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞生长及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法将实验组PC12细胞分成两组：实验一组分别加入不同终浓度（0.005、0.025、0.05、0.1、0.25、0.5、1.0、2.0μmol/L）17-AAG培养液;实验二组分别加入150μg/L VEGF（VEGF组）、0.1μmol/L17-AAG（17-AAG组）、0.1μmol/L17-AAG＋150μg/L VEGF（17-AAG＋VEGF组）培养液。另设DMSO组（阴性对照组）和空白对照组。采用MTT法检测细...

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Published in上海交通大学学报（医学版） Vol. 31; no. 12; pp. 1687 - 1691
Main Author 马贵 祝宇 吴瑜璇 沈周俊 盛佳燕 徐云泽
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科,上海,200025 2011
Subjects
17-丙烯胺-17去甲氧格尔德霉素
PC12细胞
嗜铬细胞瘤
热休克蛋白90
细胞凋亡
血管内皮生长因子
热休克蛋白90
细胞凋亡
嗜铬细胞瘤
血管内皮生长因子
PC12细胞
17-丙烯胺-17去甲氧格尔德霉素
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ISSN1674-8115
DOI10.3969/j.issn.1674-8115.2011.12.006

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Summary:目的探讨热休克蛋白90（HSP90）抑制剂17-丙烯胺-17去甲氧格尔德霉素（17-AAG）对大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞生长及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法将实验组PC12细胞分成两组：实验一组分别加入不同终浓度（0.005、0.025、0.05、0.1、0.25、0.5、1.0、2.0μmol/L）17-AAG培养液;实验二组分别加入150μg/L VEGF（VEGF组）、0.1μmol/L17-AAG（17-AAG组）、0.1μmol/L17-AAG＋150μg/L VEGF（17-AAG＋VEGF组）培养液。另设DMSO组（阴性对照组）和空白对照组。采用MTT法检测细胞存活率;Wrights-Giemsa染色观察细胞形态变化;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blotting检测细胞中VEGF-165蛋白的表达。结果 17-AAG呈时间、剂量依赖性抑制PC12细胞增殖（P〈0.05）;24 h半数抑制浓度（IC50）为0.1μmol/L。0.1μmol/L 17-AAG作用于PC12细胞6、12、24、48 h的细胞凋亡率均明显高于空白对照组（P〈0.01）。0.1μmol/L 17-AAG作用于PC12细胞6、12、24、48 h,VEGF-165蛋白表达逐渐降低;各时点VEGF-165蛋白表达量与阴性对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 HSP90抑制剂17-AAG能抑制PC12细胞增殖,诱导细胞凋亡,抑制VEGF蛋白表达。
Bibliography:PC12 cells; pheochromocytoma; heat shock protein 90; 17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin; vascular endothelial growth factor; apoptosis
MA Gui,ZHU Yu,WU Yu-xuan,SHEN Zhou-jun,SHENG Jia-yan,XU Yun-ze（Department of Urology,Ruijin Hospital,Shanghai Jiaotong University School of Medicine,Shanghai200025,China）
Objective To investigate the effects of 17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin（17-AAG）,heat shock protein 90（HSP90） inhibitor,on the growth and expression of vascular endothelial growth factor（VEGF） in pheochromocytoma cell line PC12 in rats. MethodsPC12 cells in experiment group were divided into experiment group 1 and experiment group 2.PC12 cells in experiment 1 were treated with different concentrations（0.005 μmol/L,0.025 μmol/L,0.05 μmol/L,0.1 μmol/L,0.25 μmol/L,0.5 μmol/L,1.0 μmol/L and 2.0 μmol/L） of 17-AAG culture fluid respectively,and those in experiment group 2 were treated with 150 μg/L VEGF culture fluid（VEGF group）,0.1 μmol/L 17-AAG culture fluid（17-AAG group） and 0.1 μmol/L17-AAG＋150 μg/L VEG
ISSN:1674-8115
DOI:10.3969/j.issn.1674-8115.2011.12.006