野生型斑马鱼胚胎中hoxd3基因mRNA的表达谱

R786; 目的:为探讨hoxd3基因在斑马鱼发育过程中与血管形成可能的作用机制,用hoxd3基因的反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交,观测hoxd3基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达情况.方法:提取斑马鱼胚胎总RNA,经RT-PCR扩增斑马鱼hoxd3基因片段,将得到的hoxd3基因片段和pCS2+质粒经EcoRⅠ、Xba Ⅰ双酶切后插入pCS2+质粒中,挑选阳性克隆,通过双酶切、菌落PCR以及测序鉴定；将pCS2+ -hoxd3重组子经EcoRⅠ酶切线性化,经T3RNA体外转录体系合成地高辛标记的hoxd3基因的反义mRNA探针.用hoxd3基因的反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Published in浙江大学学报（医学版） Vol. 41; no. 1; pp. 69 - 74
Main Authors 舒莉萍, 何志旭, 姚冬静, 马健娟, 李涛, 叶芝旭
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 贵阳医学院免疫教研室,贵州贵阳550004%贵阳医学院组织工程与干细胞实验中心,贵州贵阳550004 2012
贵阳医学院儿科教研室,贵州贵阳550004%贵阳医学院儿科教研室,贵州贵阳,550004
贵阳医学院组织工程与干细胞实验中心,贵州贵阳550004
Subjects
斑马鱼
质粒/遗传学
胚胎发育
转染
遗传载体
原位杂交
基因表达
寡核苷酸类,反义/遗传学
内皮,血管/细胞学
Online AccessGet full text
ISSN1008-9292
DOI10.3785/j.issn.1008-9292.2012.01.012

Cover

More Information
Summary:R786; 目的:为探讨hoxd3基因在斑马鱼发育过程中与血管形成可能的作用机制,用hoxd3基因的反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交,观测hoxd3基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达情况.方法:提取斑马鱼胚胎总RNA,经RT-PCR扩增斑马鱼hoxd3基因片段,将得到的hoxd3基因片段和pCS2+质粒经EcoRⅠ、Xba Ⅰ双酶切后插入pCS2+质粒中,挑选阳性克隆,通过双酶切、菌落PCR以及测序鉴定；将pCS2+ -hoxd3重组子经EcoRⅠ酶切线性化,经T3RNA体外转录体系合成地高辛标记的hoxd3基因的反义mRNA探针.用hoxd3基因的反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交.结果:构建和鉴定了pCS2+ -hoxd3重组质粒,经斑马鱼全胚胎原位杂交检测hoxd3基因的表达,发现在Tuebingen野生型斑马鱼受精后24 h～72 h胚胎的中脑后脑交界处以及后脑中可以观察到hoxd3基因的表达.结论:hoxd3基因在Tuebingen野生型斑马鱼胚胎发育早期的神经系统高表达,未发现在血管生成区域的表达.
ISSN:1008-9292
DOI:10.3785/j.issn.1008-9292.2012.01.012