超声及超声微泡介导基因转染的可行性研究

• Published in: 西安交通大学学报（医学版） Vol. 33; no. 5; pp. 661 - 663
• Main Authors: 潘龙飞, 李丽君, 余蕾
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 西安交通大学医学院第二附属医院急诊科,陕西西安,710004%西安医学院,陕西西安,710021 2012
• Subjects: 增强型绿色荧光蛋白; 微泡; 超声; 转基因; 转染; 超声; 增强型绿色荧光蛋白; 转染; 转基因; 微泡
• ISSN: 1671-8259
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2012.05.030

目的探讨超声、超声造影剂微泡介导基因转染的可行性及所需超声照射时间。方法选择超声能量在MI=1.5、超声频率f=8MHz,向人脐静脉内皮细胞(HUVEC)悬液加入微泡后分别超声辐照20s、1、5、10、15、30min,继续培养24h。然后用台盼蓝拒染法计数活细胞,各组与对照组(无辐照)行统计学分析,选择超声辐照的最佳时长。然后,微泡与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)质粒充分孵育后,采用该时长进行超声微泡介导基因转染试验,细胞继续培养48h后,通过荧光显微镜观察EGFP的表达。结果超声辐照10、15、30min组细胞计数比对照组降低,差异有统计学差异(P<0.05)。利用超声能量在MI=1.5、超声频率f=8MHz条件下辐照5min,继续培养48h后荧光显微镜观察,有EGFP表达,细胞生长良好。结论超声微泡能够促进质粒进入细胞并转染基因。超声能量MI=1.5、超声频率f=8MHz时,超声微泡介导基因转染的最佳辐照时长为5min。