神经介素U在体外对猪树突细胞活性及功能的影响

• Published in: 南京农业大学学报 Vol. 40; no. 3; pp. 494 - 501
• Main Author: 乔文娜 王培永 李翔 马志禹 苏娟 雷治海
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 南京农业大学动物医学院,江苏南京,210095%江苏省徐州市铜山区禽病门诊部,江苏徐州,221000 2017
• Subjects: 树突细胞; 神经介素U; 细胞凋亡; 细胞因子; 细胞增殖; 细胞凋亡; cytokine; 树突细胞; dendritic cells; neuromedin U; proliferation; 细胞因子; apoptosis; 神经介素U; 细胞增殖
• ISSN: 1000-2030
• DOI: 10.7685/jnau.201702020

[目的]本文旨在探讨不同浓度神经介素U（NMU）对外周血单核源树突细胞（DC）刺激T淋巴细胞增殖和相关细胞因子分泌的影响。[方法]采集小梅山猪外周血,用集落刺激因子（GM-CSF）和IL-4联合诱导外周血单核细胞形成未成熟树突细胞,再加入脂多糖（LPS）刺激获得成熟的树突细胞,同时观察DC形态。加入不同浓度（0.01、0.1、1、10、100、1 000 nmol·L~（-1））NMU并分别培养2、4、8和12 h后,收集细胞上清液,用ELISA法测定IL-4、IL-5和IL~（-1）3的浓度。加入不同浓度（0.1、1、10、100、1 000 nmol·L~（-1））NMU培养24 h后,收集细胞,用CCK-8试剂盒和细胞凋亡检测试剂盒分别检测DC刺激混合淋巴细胞时细胞的增殖和DC凋亡率。[结果]NMU（0.1~100 nmol·L~（-1））能够抑制未成熟树突细胞（i DC）的细胞凋亡（P〈0.01）,且NMU与NMU＋LPS作用效果相一致,10 nmol·L~（-1）NMU组与10 nmol·L~（-1）NMU＋LPS组都能降低i DC凋亡,凋亡率分别为2.383%和2.360%,与LPS组相比,NMU＋LPS组抑制i DC细胞凋亡效果极显著（P〈0.01）,说明NMU与LPS协同发挥抑制i DC细胞凋亡作用;与对照组相比,0.1~100 nmol·L~（-1）NMU能极显著促进m DC分泌IL-5（P〈0.01）和抑制IL-4分泌（P〈0.01）。NMU对IL~（-1）3的影响呈现多样性,低剂量（0.01~0.1 nmol·L~（-1））NMU在2、4 h抑制m DC细胞分泌IL~（-1）3（P〈0.05）,中剂量（1~10 nmol·L~（-1））NMU在2 h先抑制m DC分泌IL~（-1）3（P〈0.05）,4 h后又促进其分泌（P〈0.05）,高剂量（100~1 000 nmol·L~（-1））NMU则促进m DC分泌IL~（-1）3（P〈0.05）。经NMU诱导后,i DC和m DC均能促进T淋巴细胞增殖（P〈0.01）。[结论]在一定浓度范围内,NMU能够抑制猪树突细胞的凋亡,并提高其细胞活性和促进树突细胞刺激淋巴细胞增殖的功能,并能影响树突细胞细胞因子分泌,提示神经介素U参与了对猪免疫功能的调节。