以慢病毒构建的GFP阳性卵巢肿瘤细胞中侧群细胞的分离和动物活体内示踪

• Published in: Fu dan xue bao. Fudan University journal of medical science. Yi xue ban Vol. 37; no. 5; pp. 526 - 530
• Main Author: 陈彤 姜桦 丰有吉 张国平 林晓龙 龚文佳 陈秋雷 魏勋斌
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 复旦大学附属华山医院血液科,上海,200040%复旦大学附属妇产科医院妇科,上海,200011%复旦大学生物医学研究院,上海,200032 2010
• Subjects: 侧群细胞; 示踪; 肿瘤干细胞; 侧群细胞; 肿瘤干细胞; 示踪
• ISSN: 1672-8467
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-8467.2010.05.005

目的通过慢病毒将绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）基因转入卵巢癌细胞中,研究慢病毒感染对细胞泵出Hoechst 33342能力的影响,追踪GFP（＋）侧群（side population,SP）细胞在裸鼠体内的荧光表达和肿瘤成像。方法选用人卵巢癌细胞株HO-8910PM,以慢病毒感染GFP基因至人卵巢癌细胞株HO-8910PM,摸索以Ubiquitin启动子构建的慢病毒颗粒对该细胞的最佳感染复数（multiplicity of infection,MOI）。以流式细胞仪分选表达GFP的卵巢癌细胞株,获得高纯度的GFP（＋）HO-8910PM,检测GFP表达对Hoechst 33342染色的影响。再以流式细胞仪分选GFP（＋）SP细胞,将分选的GFP（＋）SP细胞注射入裸鼠皮下,观察GFP（＋）SP细胞的致瘤能力,并在体内观测GFP（＋）SP来源肿瘤的荧光成像。结果 Ubiquitin启动子构建的慢病毒感染不影响卵巢癌细胞拒染Hoechst 33342的能力,分选的GFP（＋）SP细胞仍能在裸鼠体内形成表达GFP的肿瘤,成瘤能力和未感染细胞相比无显著变化,GFP阳性肿瘤在成像系统中可见荧光表达。结论慢病毒感染不影响卵巢癌细胞拒染Hoechst 33342的能力,慢病毒感染后分选的GFP（＋）SP细胞仍能在裸鼠体内形成表达GFP的肿瘤,成瘤能力和未感染细胞相比无显著变化,GFP标记可以作为研究卵巢癌细胞在动物活体内生物学行为的示踪标记。