降钙素基因相关肽通过抑制Nod样受体蛋白3表达促进小鼠成骨细胞分化的研究

目的研究降钙素基因相关肽（CGRP）作用下相关炎症体和信号因子的表达变化，探讨CGRP对成骨细胞分化的作用机制。方法将不同浓度的CGRP（0、10、30、100ng·mL-1）加入到成骨细胞中，采用实时聚合酶链反应技术检测细胞内Nod样受体蛋白3（NLRP3）及白细胞介素-1β（IL-1β）mRNA的表达水平，蛋白质印迹法检测NLRP3的蛋白表达，酶联免疫吸附测定检测IL-1β的蛋白表达，流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）含量，茜素红染色显示成骨细胞分化情况。结果随着CGRP浓度的增加，NLRP3和IL-1β的蛋白表达及mRNA表达均呈降低趋势（P〈0．05），而且细胞内ROS浓度逐渐下降（...

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Published in华西口腔医学杂志 Vol. 34; no. 1; pp. 12 - 16
Main Author 蔡俊 吕俊 李适庭 高强国 张纲
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 第三军医大学附属新桥医院口腔颌面外科,重庆,400037 2016
Subjects
Nod样受体蛋白3
成骨细胞
活性氧
白介素1-β
降钙素基因相关肽
Nod样受体蛋白3
Nod-like receptor protein 3
Key words] calcitonin gene-related peptide
reactive oxygen species
成骨细胞
白介素1-β
osteoblast
活性氧
降钙素基因相关肽
interleukin-1β
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Summary:目的研究降钙素基因相关肽（CGRP）作用下相关炎症体和信号因子的表达变化，探讨CGRP对成骨细胞分化的作用机制。方法将不同浓度的CGRP（0、10、30、100ng·mL-1）加入到成骨细胞中，采用实时聚合酶链反应技术检测细胞内Nod样受体蛋白3（NLRP3）及白细胞介素-1β（IL-1β）mRNA的表达水平，蛋白质印迹法检测NLRP3的蛋白表达，酶联免疫吸附测定检测IL-1β的蛋白表达，流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）含量，茜素红染色显示成骨细胞分化情况。结果随着CGRP浓度的增加，NLRP3和IL-1β的蛋白表达及mRNA表达均呈降低趋势（P〈0．05），而且细胞内ROS浓度逐渐下降（P〈0．05）。100ng·mL-1 CGRP实验组较0ng·mL-1 CGRP对照组显著促进成骨细胞分化。结论CGRP在一定条件下，可通过抑制细胞内炎症因子的表达促进成骨细胞分化。
Bibliography:51-1169/R
Objective This study aims to investigate the regulatory effects of calcitonin gene-related peptide （CGRP） on Nod-like receptor protein 3 （NLRP3） and interleukin-1β （IL-1β） to promote osteoblast differentiation. Methods Different concentrations of CGRP （0, 10, 30, 100 ng.mL-1） were added to mouse osteoblasts in vitro. The mRNA and protein ex- pression levels of both NLRP3 and IL-1βwere examined using Real-time polymerase chain reaction and Western blot, respec- tively. Moreover, the concentrations of IL-1βprotein and intracellular reactive oxygen species （ROS） were detected using enzyme-linked immunosorbent assay and flow cytometry, respectively. The osteogenic differentiation of mouse osteoblasts was identified through alizarin red staining. Results The protein and mRNA expression levels of both NLRP3 and IL-1βsignificantly decreased （P〈0.05） with increasing CGRP concentration. Moreover, the contents of intracellular ROS gradually decreased （P〈0.05）. The osteogenic differentiation of the osteoblasts
ISSN:1000-1182
DOI:10.7518/hxkq.2016.01.003