RNAi沉默Polo—like kinase-1基因表达对大肠癌细胞端粒酶活性的影响

• Published in: Fu dan xue bao. Fudan University journal of medical science. Yi xue ban Vol. 36; no. 1; pp. 14 - 18
• Main Author: 倪国华 范钰 陈坚 钱立平 林庚金 陈功星 丁佳逸 郑树
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 江苏省丹阳市人民医院肿瘤科,江苏丹阳,212300%江苏大学附属人民医院肿瘤研究所化疗科,江苏镇江,212002%复旦大学附属华山医院消化科,上海,200040%浙江大学肿瘤研究所,浙江杭州,310009 2009
• Subjects: kinase-1; polo—like; RNA干扰; 大肠肿瘤; 小干扰RNA; 端粒酶; RNA干扰; 小干扰RNA; 端粒酶; 大肠肿瘤; polo-like kinase-1
• ISSN: 1672-8467
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-8467.2009.01.003

目的探讨polo-like kinase-1（PLK1）基因对大肠癌细胞增殖和端粒酶活性的影响。方法根据PLK1基因序列特点，设计并用化学方法合成小干扰核糖核酸分子（small interfering RNA，siRNA），转染人大肠癌SW480细胞后，分别采用实时定量PCR和Westernblot检测PLK1基因mRNA和蛋白表达水平。分别采用MTT法和TRAP—ELISA方法检测PLK1基因转染对大肠癌细胞增殖和端粒酶活性的影响。结果所设计的5个siRNA均能明显抑制大肠癌SW480细胞PLK1 mRNA水平，以P4效果最好。以P4转染处理大肠癌细胞后，PLK1 1mRNA水平和蛋白水平明显下调，且呈浓度和时间依赖性。MTT和TRAP—ELISA方法检测发现，P4 siRNA转染组细胞增殖和端粒酶活性明显受到抑制，且呈浓度和时间依赖性（P〈0．05，P〈0．（35）。结论PLK1基因对大肠癌细胞增殖具有重要的调控作用；以PLK1 siRNA转染处理大肠癌细胞，可明显抑制大肠癌细胞的恶性增殖，其机制可能与抑制端粒酶活性有关。