RUNX3基因对RAW264.7巨噬细胞极化的调控作用

• Published in: 西安交通大学学报（医学版） Vol. 39; no. 2; pp. 216 - 220
• Main Author: 李苏童;雷洁;王娟红;王琦侠;申远;姜小健;田普训
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 西安市中心医院肾病科,陕西西安,710003%西安市中心医院病理科,陕西西安,710003%西安交通大学医学部统计教研室,陕西西安,710061%西安市中心医院检验科,陕西西安,710003%西安交通大学第一附属医院肾脏病医院肾移植科,陕西西安,710061 2018
• Subjects: RAW264.7; RUNX3; 基因沉默; 巨噬细胞; 巨噬细胞极化; 基因沉默; RAW264.7; gene silence; 巨噬细胞; macrophage; macrophage polarization; RUNX3; 巨噬细胞极化
• ISSN: 1671-8259
• DOI: 10.7652/jdyxb201802012

目的 探讨RUNX3对巨噬细胞极化过程的调节作用和可能机制，为巨噬细胞参与的免疫炎症性疾病提供新的治疗思路。方法 ①分别用IFN-γ、LPS和IL-4刺激RAW264.7细胞，使用RT-PCR方法检测刺激后细胞表面标志物arginase-1、iNOS的表达变化，观察刺激后RAW264.7细胞是否向M1或者M2方向极化；设定IFN-γ和LPS共刺激的细胞为M1组，IL-4刺激的细胞为M2组；另设正常对照组为M0组；②使用免疫荧光、RT-PCR方法检测各组细胞（M1、M2、M0）RUNX3表达情况；③建立RUNX3沉默的载体，沉默RAW264.7细胞系RUNX3基因，经G418选择性培养基筛选得到稳定表达的细胞系，RT-PCR检测细胞表面标志物iNOS和CD86变化，用ELISA法检测细胞分泌物TNF-α变化。结果 ①用IFN-γ和LPS刺激RAW264.7细胞可使RAW264.7细胞向M1亚型极化，RT-PCR检测M1组细胞iNOS表达较M0组升高（P=0.002）；而使用IL-4刺激RAW264.7细胞可使RAW264.7细胞向M2亚型极化；RT-PCR检测结果显示，M2组细胞arginase-1表达较M0组升高（P=0.021）；②RUNX3 mRNA在M1组细胞与M0组相比，表达增高（P=0.001），而在M2组细胞中表达降低（P=0.041）；③沉默RUNX3后，CD86、iNOS mRNA表达较M0组降低（P=0.005），并且细胞分泌TNF-α减少（P〈0.001）。结论 RUNX3转录活化可能促进巨噬细胞向M1型极化。