Cx43基因敲除胎鼠心脏近端流出道隔心肌化过程中的关键基因

• Published in: Fu dan xue bao. Fudan University journal of medical science. Yi xue ban Vol. 37; no. 1; pp. 52 - 58
• Main Author: 陈伟呈 张颖 黄国英
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 复旦大学附属儿科医院心血管中心,上海,201102 2010
• Subjects: BMP; Cx43; Ptk2; Ssr1; TGFβ; 信号通路; 基因芯片; 小鼠; 心脏发育; gene chip; heart development; BMP; signaling pathway; 基因芯片; Ptk2; mouse; Cx43; 信号通路; TGFβ; Ssr1; 心脏发育; 小鼠
• ISSN: 1672-8467
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-8467.2010.01.011

目的研究Cx43基因纯合敲除（Cx43-/-）小鼠胚胎心脏近端流出道组织中基因表达谱的改变,筛选可能导致Cx43-/-小鼠流出道梗阻的关键基因。方法以胎龄（embryonic day,ED）14.5的Cx43-/-和野生型（Cx43＋/＋）鼠胚心脏近端流出道部分为研究对象,分别提取总RNA,逆转录成cDNA,并在体外转录为cRNA,同时进行生物素标记及片段化,再与Affymetrix-430 2.0基因芯片进行杂交。杂交信号经扫描后,应用相关生物信息软件分析基因表达情况。结果与Cx43＋/＋组相比,Cx43-/-组中表达上调2倍以上的基因共有143个,表达下调2倍以上的基因有235个。其中表达差异的基因参与转录调控、细胞周期、细胞黏附、细胞活动和细胞骨架的信号通路等主要生理过程。进一步筛查表达差异1.5倍以上的基因发现,与圆锥动脉干畸形相关的TGFβ/BMP信号通路上的多个基因以及Ssr1、Ptk2、Bmp6等基因在Cx43-/-组有明显变化。对这些基因进行荧光定量PCR验证,结果与基因芯片一致（P〈0.05）。结论利用基因芯片技术初步筛选出与Cx43-/-鼠胚心脏近端流出道发育有关的多个基因,并经荧光定量PCR验证。其中TGFβ/BMP信号通路上的多个基因以及Ssr1、Ptk2、Bmp6等基因可能与Cx43-/-小鼠流出道梗阻的发生有关。