miR-133b对骨肉瘤细胞MG-63增殖的抑制作用及其机制

• Published in: 山东医药 Vol. 56; no. 45; pp. 40 - 42
• Main Author: 林琰杰 于嘉智 魏传银
• Format: Magazine Article
• Language: Chinese
• Published: 淄博市第一医院,山东淄博,255200%济南市儿童医院 2016
• Subjects: Kruppel样因子4; miRNA-133b; 细胞增殖; 骨肉瘤; Kruppel 样因子 4; miRNA-133b; 骨肉瘤; 细胞增殖
• ISSN: 1002-266X
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2016.45.012

目的探讨miR-133b是否通过下调KLF4抑制骨肉瘤细胞系MG-63的增殖。方法将MG-63细胞分为对照组、miR-NC组和miR-133bmimic组,对照组不做干预,miR-NC组转染miR-NC,miR-133bmimic组转染miR-133bmimic。24 h后,Western blotting法检测MG-63细胞中与细胞增殖相关的蛋白p21、p27、PCNA、Ki-67以及KLF4的表达,12、24、48 h后,MTT法观察细胞增殖活力,利用荧光素酶试验验证KLF4是miR-133b的靶基因;将MG-63细胞随机分为miR-133b组、miR-133b＋KLF4组、miR-133b＋空质粒组,分别转染miR-133bmimic、miR-133bmimic＋KLF4过表达质粒、miR-133bmimic＋空质粒。检测MG-63细胞中p21、p27、PCNA、Ki-67、KLF4的表达,并观察细胞增殖情况。结果相比于miR-NC组,miR-133bmimic组中,24、48 h MG-63细胞的增殖活力降低（P均〈0.01）,PCNA、Ki-67、KLF4的表达减少,p21、p27表达增加（P均〈0.05或〈0.01）。荧光素酶试验结果显示,miR-133b能够显著降低KLF4-3＇-UTR质粒的荧光素活性（P〈0.05）;相比于miR-133b＋空质粒组,miR-133＋KLF4组MG-63细胞中PCNA、Ki-67表达增加（P均〈0.05）,p21、p27表达减少（P均〈0.01）,细胞增殖率升高（P〈0.01）。结论miR-133b通过下调KLF4表达从而抑制骨肉瘤细胞系MG-63的增殖。