PC12细胞转染人GPx-1基因后的抗氧化损伤作用

目的探讨GPx-1高表达在H2O2介导的PC12细胞损伤时的保护作用及分子机制。方法将PC12细胞转染含人GPx-1基因的plncx质粒及空载体plncx质粒,经持续筛选建立起稳定表达人GPx-1基因和空质粒plncx的PC12细胞系。对PC12、GPx-1-PC12、plncx-PC12 3组细胞,分别给予H2O2和亚硒酸钠＋H2O2干预方式,GPx活性检测试剂盒检测各组细胞GPx活性;MTT法检测细胞的存活情况;流式细胞仪检测细胞凋亡发生的情况;免疫细胞化学法观察NF-κBp65的表达情况。结果 GPx-1-PC12组细胞GPx活性较对照组明显增高;3组细胞分别给予2种干预后,PC12与p...

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Published in西安交通大学学报（医学版） Vol. 34; no. 4; pp. 460 - 464
Main Author 马琳 王辉 王淑荣 陈蓉 郑俩燕
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 海南医学院附属医院神经内科,海南海口,570102%西安交通大学医学院第二附属医院老年神经科,陕西西安,710004 2013
Subjects
PC12细胞
核因子-kappaB（NF-κB）
细胞凋亡
谷胱甘肽过氧化物酶1（GPx-1）
过氧化氢（H2O2）
细胞凋亡
过氧化氢(H2O2)
PC12细胞
谷胱甘肽过氧化物酶1(GPx-1)
核因子-kappa
B(NF-κB)
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ISSN1671-8259

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Summary:目的探讨GPx-1高表达在H2O2介导的PC12细胞损伤时的保护作用及分子机制。方法将PC12细胞转染含人GPx-1基因的plncx质粒及空载体plncx质粒,经持续筛选建立起稳定表达人GPx-1基因和空质粒plncx的PC12细胞系。对PC12、GPx-1-PC12、plncx-PC12 3组细胞,分别给予H2O2和亚硒酸钠＋H2O2干预方式,GPx活性检测试剂盒检测各组细胞GPx活性;MTT法检测细胞的存活情况;流式细胞仪检测细胞凋亡发生的情况;免疫细胞化学法观察NF-κBp65的表达情况。结果 GPx-1-PC12组细胞GPx活性较对照组明显增高;3组细胞分别给予2种干预后,PC12与plncx-PC12组细胞存活率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,GPx-1-PC12较PC12、plncx-PC12组细胞存活率明显增高（P〈0.01）;GPx-1-PC12较PC12、plncx-PC12细胞早期和晚期凋亡率明显下降,存在统计学差异（P〈0.01）;GPx-1-PC12较PC12细胞NF-κBp65表达明显减少（P〈0.01）。结论 GPx-1基因高表达对H2O2所致的PC12细胞氧化损伤有很好的保护作用;GPx-1可抑制PC12细胞氧化损伤时凋亡的发生及NF-κB的表达。
Bibliography:PC12 cell; glutathione peroxidase 1（GPx-1）; nuclear factor-kappa B（NF-κB）; hydrogen peroxide（H2O2）; cell apoptosis
MA Lin,WANG Hui,WANG Shu-rong,CHEN Rong,ZHENG Liang-yan（1.Department of Neurology,the Affiliated Hospital of Hainan Medical College, Haikou 570102;2.Department of Senile Neurology,the Second Affiliated Hospital, Medical School of Xi＇an Jiaotong University,Xi＇an 710004,China）
Objective To study the protective effect and molecular mechanism of glutathione peroxidase 1（GPx-1） high expression on PC12 cell damage mediated by hydrogen peroxide（H2O2）.Methods PC12 cells were transfected with plncx plasmid containing human GPx-1 gene and plncx plasmid,and a PC12 cell line was established that could stably express human GPx-1 gene and plncx plasmid through continuous screening.Two means of intervention,H2O2 and sodium selenite ＋ H2O2,were given to PC12,GPx-1-PC12 and plncx-PC12 cells,respectively.GPx activity of cells in each group was detected with GPx activity detection kit;the survival and apoptosis of ce
ISSN:1671-8259