利用qRT-PCR技术对PVY重组株系的鉴定

• Published in: 西南农业学报 Vol. 31; no. 2; pp. 238 - 244
• Main Author: 尚慧;韩树鑫;高艳玲;张威;范国权;申宇;聂先舟;吕文河;白艳菊
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所,黑龙江哈尔滨150086%黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所,黑龙江哈尔滨,150086%加拿大农业部马铃薯研究中心,加拿大弗莱德里克顿E3B4Z7%东北农业大学农学院,黑龙江哈尔滨150030 2018; 东北农业大学农学院,黑龙江哈尔滨,150030%东北农业大学农学院,黑龙江哈尔滨150030; 黑龙江省农业科学院克山分院,黑龙江齐齐哈尔161005
• Subjects: 马铃薯Y病毒（PVY）;株系分化;实时荧光定量PCR技术（qRT-PCR）; 株系分化; Strain differentiation; 马铃薯Y病毒(PVY); Real time quantitative PCR (qRT-PCR); Potato virus Y (PVY); 实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)
• ISSN: 1001-4829
• DOI: 10.16213/j.cnki.scjas.2018.2.004

【目的】马铃薯Y病毒（Potato virus Y,PVY）作为制约马铃薯生产的重要病毒之一,株系分化繁杂。近年被科学家研究分离的PVY~（N-Wi）和PVY~（NTN-NW）株系而言,其基因组结构极为相似但致病性差异较大。【方法】本研究利用qRT-PCR方法,方便快捷的检测出马铃薯Y病毒的这2种不同株系,同时并使之可成功且稳定的应用于马铃薯生产中。通过查找Gen Bank已公布的PVY~（N-Wi）和PVY~（NTN-NW）株系的全基因组序列,设计用于qRT-PCR检测,扩增目的片段大小为150 bp左右的特异性引物,应用实时荧光定量PCR技术（qRT-PCR）进行检测。【结果】通过设计的引物对保存的试管苗毒源进行检测,可以成功的精准鉴别出PVY~（N-Wi）和PVY~（NTN-NW）株系;同时对100份田间采集的叶片样品进行检测,成功的检测出100份样品中32份样品,受到PVY~（N-Wi）株系侵染;27份样品,受到PVY~（NTN-NW）株系侵染;同时存在9份样品,可能同时受到PVY~（N-Wi）、PVY~（NTN-NW）株系的侵染。【结论】实时荧光定量PCR技术（qRT-PCR）可适用于马铃薯叶片样品的检测,为株系的快速鉴定提供了可靠的方法,可用于生产中大规模样品的检测,有利于及时采取防控措施,降低损失。