抗人肺腺癌单抗5F—11噬菌体抗体库的构建及表达

• Published in: Zhongguo fei ai za zhi Vol. 5; no. 2; pp. 119 - 122
• Main Author: 岳文涛 赖百塘 等
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 101149,北京市结核病胸部肿瘤研究所北京市肿瘤分子生物学实验室肺癌分室 2002
• Subjects: RT－PCR法; ScFv基因; 单链抗体; 噬菌体展示文库; 抗人肺腺癌单抗5F－11; 抗体库; 抗体表达; 构建; 肺腺癌; 抗体库; 噬菌体展示; ScFv; 肺腺癌
• ISSN: 1009-3419; 1999-6187

目的：构建抗人肺癌单抗5F－11的噬菌体显示文库。方法：利用RT－PCR方法从5F－11杂交瘤细胞扩增抗体轻重链可变区基因， 用连接子连接成为ScFv基因后克隆至噬菌体载体pCANTAB5E。以肺腺癌细胞系A2为抗原进行5轮筛选，得到富集的次级噬菌体表达文库。结果：制备了库 容为8×10^7pfu/ml的噬菌体展示文库。随机抽取未经筛选的克隆进行 酶切，酶切图谱呈多样性，富集后的酶切图谱则显示特异构型的噬菌体得到富集。检测30个噬体克隆上清，其中23个与A2细胞有较强反应。结论：本研究获得了抗人肺腺癌单抗5F－11的单链抗体，为拓展抗体的应用创造了条件。