生长分化因子11对软脂酸诱导小鼠主动脉内皮细胞损伤的保护作用

目的探索生长分化因子11 （GDF-11）对软脂酸（PA）诱导的小鼠主动脉内皮细胞（MAECs）的作用及其相关机制。 方法通过加或不加内皮型一氧化氮合酶（eNOS）抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）或Smad3抑制剂SIS3研究eNOS和Smad通路在GDF-11保护软脂酸诱导的MAECs中的作用，将MAECs分为：（1）对照组；（2）PA组；（3）PA＋GDF-11组；（4）PA＋GDF-11＋L-NAME组；（5）PA＋GDF-11＋SIS3组，培养24 h后，活性氧试剂盒及实时-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测各组细胞氧化应激水平；流式细胞术检测各组细胞凋亡率；Wester...

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Published in中华糖尿病杂志 Vol. 9; no. 2; pp. 122 - 129
Main Author 梅稳 向光大 卢俊颜 李欢 刘敏 向林 董靖
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 430070,广州军区武汉总医院内分泌科%南方医科大学附属南方医院内分泌科 2017
Subjects
1
凋亡
小鼠主动脉内皮细胞
生长分化因子1
软脂酸
小鼠主动脉内皮细胞
生长分化因子11
Mice aorta endothelial cells
Growth differentiation factor 11
凋亡
Palmitate acids
软脂酸
Apoptosis
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Summary:目的探索生长分化因子11 （GDF-11）对软脂酸（PA）诱导的小鼠主动脉内皮细胞（MAECs）的作用及其相关机制。 方法通过加或不加内皮型一氧化氮合酶（eNOS）抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）或Smad3抑制剂SIS3研究eNOS和Smad通路在GDF-11保护软脂酸诱导的MAECs中的作用，将MAECs分为：（1）对照组；（2）PA组；（3）PA＋GDF-11组；（4）PA＋GDF-11＋L-NAME组；（5）PA＋GDF-11＋SIS3组，培养24 h后，活性氧试剂盒及实时-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测各组细胞氧化应激水平；流式细胞术检测各组细胞凋亡率；Western blotting法检测各组抗凋亡蛋白Bcl-2、凋亡蛋白Bax及Cleaved-caspase3蛋白表达水平。研究GDF-11对MAECs Smad信号通路的影响，MAECs分为：（1）对照组；（2）GDF-11组；（3）GDF-11＋转化生长因子β（TGF-β）受体Ⅰ抑制剂组（GDF-11＋ SB431542组），培养30 min后，免疫荧光染色法检测各组MAECs细胞磷酸化Smad2/3 （P-Smad2/3）表达水平；研究GDF-11对MAECs AMPK/eNOS信号通路的影响，MAECs分为：（1）对照组；（2）GDF-11组；（3） GDF-11＋AMPK抑制剂Compound C组；（4）GDF-11＋L-NAME组；（5）GDF-11＋Compound C＋L-NAME组，培养30 min后，Western blotting法检测各组细胞AMPK、磷酸化AMPK （P-AMPK）、eNOS、磷酸化eNOS （P-eNOS）、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt （P-Akt）、蛋白激酶A （PKA）、磷酸化PKA （P-PKA）水平。多组之间比较采用单因素方差分析，组间多重比较用最小显著性差异t检验。 结果与对照组相比，PA组细胞氧化应激和凋亡率显著增加（28.9%±2.2％比7.9%±1.5%），PA＋GDF-11组细胞氧化应激和凋亡率明显低于PA组（12.6%±1.6％比28.9%±2.2%），而PA＋GDF-11＋L-NAME组和PA＋GDF-11＋SIS3组细胞氧化应激和凋亡率又明显低于PA＋GDF-11组（分别为21.8%±2.0%、20.1%±1.8%、12.6%±1.6%，F= 97.89，P
Bibliography:Mei Wen, Xiang Guangda, Lu Junyan, Li Huan, Liu Min, Xiang Lin, Dong Jing.（Department of Endocrinology, Wuhan General Hospital of Guangzhou Military Command, Wuhan 430070, China）
Growth differentiation factor 11; Mice aorta endothelial cells; Palmitate acids;Apoptosis
Objective To explore the effects of growth differentiation factor 11 （GDF-11） on mice aorta endothelial cells （MAECs） cultured with palmitate acids （PA） and the possible mechanism involved.Methods To study the function of endothelial nitric oxide synthase（eNOS） and Smad pathways in GDF-11 protective effect by pre-incubated with inhibitors against eNOS（L-NAME） or Smad3 inhibitor（SIS3）. MAECs were divided into five groups：the control group, PA group, PA＋GDF-11 group, PA＋GDF-11 ＋L-NAME group and PA＋GDF-11 ＋SIS3 group, all the cells in the 5 groups were cultured for 24 h. Reactive oxygen species assay kit and reverse transcription polymerase chain reaction（RT-PCR） were used to determine the oxidative stress in MAECs and flow cytometry were used to ass
ISSN:1674-5809
DOI:10.3760/cma.j.issn.1674?5809.2017.02.009