逆转录病毒介导的人endostatin基因疗法抗肿瘤作用研究

• Published in: Chinese medical journal Vol. 115; no. 11; pp. 1664 - 1669
• Main Author: 王轩 李希 等
• Format: Journal Article
• Language: Chinese; English
• Published: 南京大学医学院,南京军区总院普外研究所,南京,210002%南京大学生命科学系,南京,210002%南京军区军医学院分子生物学研究室,南京,210002 2002
• Subjects: 人肝癌细胞; 内皮抑制素; 基因疗法; 逆转录病毒; retrovirus; 内皮抑制素; endostatin; 基因疗法; 人肝癌细胞; human liver carcinoma; gene therapy; 逆转录病毒
• ISSN: 0366-6999; 2542-5641
• DOI: 10.3760/j.issn:0366-6999.2002.11.015

目的：探讨逆转录病毒介导人血管内皮抑制素基因（endostatin）对人肝癌细胞的生长抑制作用。方法：利用逆转录病毒载体pLocx构建含有人endostatin基因及信号肽的重组逆转录病毒质粒，并将其导入PA317细胞制备重组病毒。用重组病毒感染人肝癌细胞SMMC7721获得稳定转入endostatin基因细胞株(SMM-endo)。同样用空白病毒质粒制备对照细胞株SMMC-pLocx。免疫组化及Western blot检测人endostatin基因在转染细胞中的表达和分泌。应用血管内皮细胞生长抑制性试验证转染细胞株表达的人endostatin的生物学活性。同时对转染细胞株在体内外的生长情况进行观察。结果：免疫组化及Western blot印迹分析证实转染人endostatin基因的肝癌细胞能表达并分泌人endostatin.与转染空白对照组（SMMC-pLncx）相比，表达人endostatin的SMMC7721浓缩上清可显著抑制人脐静脉血管内皮细胞生长，抑制率达48%,明显高于对照组10.2％（P<0.01）。体外生长实验显示，SMMC-endo细胞与对照细胞SMMC-pLnex体外生长速率无明显差别。而在转染细胞接种裸鼠22d后，转染人endostatin基因的肿瘤细胞生长明显受到抑制，仅在部分裸鼠（3/5只）体内长出肿瘤，并且产生的腹侧肿瘤体积较对照组肿瘤缩小94.5％（P<0.001）。结论：逆转录病毒介导人endostatin基因疗法是治疗肿瘤的一个有效方法。