免疫荧光联合原位杂交技术检测骨肉瘤患者外周血中循环肿瘤细胞的表达及临床意义

目的探讨骨肉瘤患者外周血中循环肿瘤细胞（CTCs）的表达及其与患者预后的关系。方法采用活体细胞荧光示踪技术验证了免疫磁珠富集法回收细胞的能力，应用流式细胞术检测HOS细胞、HepG2细胞和人白细胞中CD45和CK18的表达，采用荧光原位杂交检测HOS细胞染色体倍数异常情况。采用免疫荧光联合原位杂交技术（iFISH）检测23例骨肉瘤患者中外周血CTCs，分析CTCs计数与患者预后的关系。结果免疫磁珠CD45差减富集法富集HOS细胞的回收率〉90%。流式细胞术检测显示，HOS细胞呈CD45（－）和CK18（－）。CEP8杂交探针信号〉2的细胞占总细胞数的96.5%，其中探针信号数为3的细胞占异常细...

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Published in中华肿瘤杂志 Vol. 39; no. 7; pp. 485 - 489
Main Author 张浩强 李明辉 王臻 蓝平衡 鲁亚杰 陈国景 王岭
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 第四军医大学西京医院骨肿瘤科, 西安,710032 2017
Subjects
免疫荧光联合原位杂交
循环肿瘤细胞
液态活检
预后
骨肉瘤
Prognosis
免疫荧光联合原位杂交
Osteosarcoma
骨肉瘤
液态活检
Immunofluorescence and fluorescence in situ hybridization
预后
Liquid biopsy
Circulating tumor cells
循环肿瘤细胞
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ISSN0253-3766
DOI10.3760/cma.j.issn.0253-3766.2017.07.002

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Summary:目的探讨骨肉瘤患者外周血中循环肿瘤细胞（CTCs）的表达及其与患者预后的关系。方法采用活体细胞荧光示踪技术验证了免疫磁珠富集法回收细胞的能力，应用流式细胞术检测HOS细胞、HepG2细胞和人白细胞中CD45和CK18的表达，采用荧光原位杂交检测HOS细胞染色体倍数异常情况。采用免疫荧光联合原位杂交技术（iFISH）检测23例骨肉瘤患者中外周血CTCs，分析CTCs计数与患者预后的关系。结果免疫磁珠CD45差减富集法富集HOS细胞的回收率〉90%。流式细胞术检测显示，HOS细胞呈CD45（－）和CK18（－）。CEP8杂交探针信号〉2的细胞占总细胞数的96.5%，其中探针信号数为3的细胞占异常细胞的65.0%。23例骨肉瘤患者中，19例患者外周血中检测到CTCs。复发和（或）转移患者CTCs计数为（2.846±1.281）个，无复发和转移患者的CTCs计数为（1.400±1.506）个，差异有统计学意义（P＝0.021）。结论利用iFISH可以检测到骨肉瘤患者外周血CTCs，且CTCs计数与患者的预后有关，CTCs可以作为骨肉瘤患者病情变化的预测指标。临床试验注册 中国临床试验注册中心，ChiCTR－OOC－15005925。
Bibliography:Osteosarcoma; Circulating tumor cells; Immunofluorescence and fluorescence in situ hybridization; Liquid biopsy; Prognosis
Zhang Haoqiang, Li Minghui, Wang Zhen, Lan Pingheng, Lu Yajie, Chen Guojing, Wang Ling （Department of Orthopedic Surgery and Oncology, Xi-Jing Hospital, the Fourth Military Medical University, Xi＇an 710032, China）
11-2152/R
Objective To investigate the clinical significance of detection of circulating tumor ceils （CTCs） in peripheral blood from patients with osteosarcoma （OS） using the iFISH （immunofluoreseenee and fluorescence in situ hybridization） method. Methods The live cells recovery rate of immune-magnetic beads was evaluated by live-cell fluorescent tracer technology. The expression of CD45 and CK18 on the cell surface of HOS and HepG2 cells was measured by flow eytometry. And the chromosome aneuploidy was detected by centromeric FISH probe CEP8. Subsequently, 23 OS patients were enrolled and divided into two groups, relapse or metastasis group and primary group. And the prognostic s
ISSN:0253-3766
DOI:10.3760/cma.j.issn.0253-3766.2017.07.002