P38MAPK抑制剂SB203580对高糖诱导HK-2细胞转分化的影响

目的探讨不同浓度P38丝裂原活化蛋白激酶（P38MAPK）抑制剂SB203580在高糖诱导肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化（TEMT）过程中的机制及其较佳作用浓度。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞（HK-2）并分为对照组（5.5 mmol/L GS）、DMSO组（5.5 mmol/L GS＋30μmol/L SB203580等体积的DMSO）、高糖组（30mmol/L GS）,以及30 mmol/L GS＋5、10、20、30μmol/LSB203580处理的S5、S10、S20及S30组,干预48 h。四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖情况,计算半数抑制浓度（IC50）;选取对照组、高...

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Published in天津医药 Vol. 44; no. 4; pp. 426 - 429
Main Author 贾林 林智峰 马莉 唐玉玲 杨锐 杨晓萍
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 石河子大学第一附属医院肾病科 邮编832008 2016
Subjects
P38丝裂原活化蛋白激酶
SB203580
上皮细胞
上皮间质转分化
糖尿病肾病
肾小管
糖尿病肾病
kidney tubules
P38MAPK
上皮间质转分化
epithelial cells
上皮细胞
epithelial-mesenchymaltransition
SB203580
P38丝裂原活化蛋白激酶
肾小管
diabetic nephropathy
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ISSN0253-9896
DOI10.11958/20150004

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Summary:目的探讨不同浓度P38丝裂原活化蛋白激酶（P38MAPK）抑制剂SB203580在高糖诱导肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化（TEMT）过程中的机制及其较佳作用浓度。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞（HK-2）并分为对照组（5.5 mmol/L GS）、DMSO组（5.5 mmol/L GS＋30μmol/L SB203580等体积的DMSO）、高糖组（30mmol/L GS）,以及30 mmol/L GS＋5、10、20、30μmol/LSB203580处理的S5、S10、S20及S30组,干预48 h。四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖情况,计算半数抑制浓度（IC50）;选取对照组、高糖组、S30组,Western blot法检测P38MAPK、P-P38MAPK及α-平滑肌肌动蛋白（SMA）的表达、免疫荧光法检测α-SMA的表达。结果 （1）与对照组相比,DMSO对HK-2细胞增殖无显著抑制作用（P〉0.05）;高糖组、S5组HK-2细胞增殖增多（P〈0.05）;S20、S30组HK-2细胞增殖减少（P〈0.05）。与高糖组相比,S5、S10、S20、S30组细胞增殖均受到抑制（P〈0.05）。（2）与对照组相比,高糖组、S30组P-P38MAPK表达量增高（P〈0.05）。与高糖组相比,S30组P-P38MAPK的表达量降低（P〈0.05）。3组P38MAPK表达量无显著差异（P〉0.05）。（3）与对照组相比,高糖组、S30组α-SMA表达量增高（P〈0.05）。与高糖组相比,S30组α-SMA表达量降低（P〈0.05）。结论 30 mmol/L GS可以诱导HK-2细胞TEMT;30μmol/L SB203580是抑制HK-2细胞TEMT的较佳抑制浓度,SB203580可能通过下调P-P38MAPK表达,从而抑制HK-2细胞增殖及胞浆中α-SMA的表达,延缓TEMT进程。
Bibliography:diabetic nephropathy; kidney tubules; epithelial cells; epithelial-mesenchymaltransition; P38MAPK; SB203580
JIA Lin, LIN Zhifeng, MA Li, TANG Yuling, YANG Rui, YANG Xiaoping （ Division of Nephrology, the First Affiliated Hospital, College of Medicine, Shihezi University, Shihezi 832008, China ）
Objective To observe the effects of different concentrations of SB203580, the inhibitor of P38 MAPK, inprocess of high glucose（GS）-induced renal tubular epithelial-myofibroblast transdifferentiation（TEMT）. Methods Thecultured human renal tubular epithelial cells（HK-2） were divided into control group（5.5 mmol/L GS）, GS（30 mmol/L GS）group and different concentrations of SB203580（30 mmol/L GS ＋5, 10, 20 and 30 μmol/L SB203580） groups. The treat-ments were for 48 hours. MTT assay was used to observe cell proliferation. The median inhibiting concentration（IC50） was cal-culated. Western blot assay was used to detect the expressions of P38 MAPK, P-P38 MAPK and α-smooth muscle actin（α-SMA） in control group, high-glucose group an
ISSN:0253-9896
DOI:10.11958/20150004