SLP-2基因反义核酸对食管鳞癌细胞系TE12生长和增殖的影响

R735.1; 背景与目的:应用cDNA微阵列从食管鳞癌配对组织中得到一批在食管鳞癌中差异表达的基因,其中包括SLP-2(stomatin-like protein 2,SLP-2),它在食管鳞癌中高表达.为验证SLP-2在食管鳞癌中的高表达,构建SLP-2真核表达载体,以探讨SLP-2与食管鳞癌发生、发展的关系.方法:利用PCR从正常食管上皮cDNA中扩增SLP-2的开放阅读框,将SLP-2重组到pcDNA3.1/myc-His(-)中,构建SLP-2的真核表达质粒.然后将重组子导入食管鳞癌细胞系TE12中.半定量RT-PCR鉴定转染细胞,获得阳性细胞克隆.采用MTT比色法、平板克隆形成实验...

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Published in癌症 Vol. 24; no. 2; pp. 155 - 159
Main Authors 张立勇, 丁芳, 刘仲敏, 李文东, 刘芝华, 李衍达
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 清华大学自动化系生物信息学教育部重点实验室,北京,100084 2005
中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室,北京,100021%中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室,北京,100021%清华大学自动化系生物信息学教育部重点实验室,北京,100084
Subjects
SLP-2
细胞转染
食管肿瘤
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ISSN1000-467X
DOI10.3321/j.issn:1000-467X.2005.02.006

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Summary:R735.1; 背景与目的:应用cDNA微阵列从食管鳞癌配对组织中得到一批在食管鳞癌中差异表达的基因,其中包括SLP-2(stomatin-like protein 2,SLP-2),它在食管鳞癌中高表达.为验证SLP-2在食管鳞癌中的高表达,构建SLP-2真核表达载体,以探讨SLP-2与食管鳞癌发生、发展的关系.方法:利用PCR从正常食管上皮cDNA中扩增SLP-2的开放阅读框,将SLP-2重组到pcDNA3.1/myc-His(-)中,构建SLP-2的真核表达质粒.然后将重组子导入食管鳞癌细胞系TE12中.半定量RT-PCR鉴定转染细胞,获得阳性细胞克隆.采用MTT比色法、平板克隆形成实验、流式细胞术和MTS比色法分析SLP-2对TE12细胞的影响.结果:SLP-2在食管鳞癌中高表达.SLP-2基因反义转染抑制TE12细胞SLP-2表达时,可抑制细胞生长和增殖,导致S期阻滞,并抑制TE12细胞的粘附功能.结论:食管鳞癌中SLP-2表达上调促进TE12细胞过度生长和增殖,并参与食管鳞癌的转移.
ISSN:1000-467X
DOI:10.3321/j.issn:1000-467X.2005.02.006