肝细胞生长因子对卵巢癌细胞侵袭的促进作用及信号转导途径

• Published in: Ai zheng Vol. 25; no. 5; pp. 570 - 575
• Main Author: 王化丽 张淑兰 鲁艳明 姜继勇 朱晓钰
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 中国医科大学附属二院妇产科,辽宁,沈阳,110004%大连市妇产医院,辽宁,大连,116033%大连市中心医院中心实验室,辽宁,大连,116033 2006
• Subjects: SKOV3细胞; 信号转导; 卵巢肿瘤; 明胶酶B; 核转录因子; 肝细胞生长因子; 卵巢肿瘤; 信号转导; 核转录因子; SKOV3细胞; 明胶酶B; 肝细胞生长因子
• ISSN: 1000-467X
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2006.05.010

背景与目的：肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor．HGF）与其受体c-met特异性结合，激活多条信号转导通路，在调节肿瘤侵袭、转移和血管形成中起重要作用。HGF和c-met在卵巢癌组织中异常表达。本研究拟探讨HGF在卵巢癌的侵袭中的作用、可能机制及其信号转导途径。方法：Boyden小室体外侵袭实验检测HGF对卵巢癌SKOV3细胞穿透人工重组基底膜能力的影响；应用荧光实时定量逆转录聚合酶链反应（real-time reverse transcription polymerase chain reaction，real time RT-PCR）、Westem blot和流式细胞术检测HGF和核转录因子nuclear factor κB，NFκB）抑制剂吡咯醛二硫氨基甲酸（pyrrolidine dithiocarbamate．PDTC）作用前后SKOV3细胞c-met、明胶酶B（gelatinase B，MMP-9）mRNA和蛋白表达的变化；采用免疫细胞化学方法和Western blot检测HGF对SKOV3细胞核NFKB蛋白的影响。结果：（1）HGF作用后，SKOV3细胞侵入基底膜的细胞数为343±13，较对照组（167±11）明显升高（P〈0．01），而PDTC可以减弱HGF的促进作用（241±10，P〈0．01）。（2）HGF作用后，SKOV3细胞MMP-9 mRNA水平升高（5．66±0．10）倍（P〈0．01），而经PDTC处理后只升高（2．75±0．80）倍（P〈0．01），c-met mRNA无变化。（3）HGF作用后，SKOV3细胞c-met、MMP-9蛋白阳性率为（96．6±2．0）％和（74．6±4．4）％，较对照组（73．3±2．4）％和（16．0±2．9）％显著增高（P〈0．01），c-met、MMP-9蛋白表达强度分别为2．84±0．18和2．94±0．13，较对照组1．65±0．19和0．54±0．18显著增高（P〈0．01）。（4）PDTC可显著抑制HGF对SKOV3细胞蛋白表达的促进作用，MMP-9蛋白阳性率和蛋白表达强度分别为（25．8±3．7）％和0．87±0．14，与对照组和HGF组的差异有显著性（P〈0．05）；对c-met蛋白表达无影响（P〉0．05）。（5）HGF作用后细胞核NFKB蛋白表达随时间延长而增加，于1h达高峰，表达强度为1．16±0．