Caspase-3在雷帕霉素诱导肝癌细胞BEL-7402凋亡中的作用

R735.7; 背景与目的:雷帕霉素是从吸水性链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)发酵液中提取,最近研究发现雷帕霉素具有免疫抑制作用和广泛的抗肿瘤作用.本研究主要探讨Caspase-3在雷帕霉素诱导肝癌细胞BEL-7402凋亡中的作用.方法:以不同浓度(5、10、20、30、40、50 nmol/L)的雷帕霉素作用于BEL-7402细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡形态学变化,采用Caspase-3试剂盒和Western blot蛋白电泳测定Caspase-3活性.结果:雷帕霉素可显著抑制BEL...

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Published in癌症 Vol. 25; no. 12; pp. 1508 - 1511
Main Authors 张俊峰, 陆敏强, 蔡常洁, 杨扬, 李华, 易慧敏, 陈规划
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 中山大学附属第三医院肝移植中心,广东,广州,510630 2006
Subjects
肝肿瘤
BEL-7402细胞
雷帕霉素/药理学
凋亡
Caspase-3
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Summary:R735.7; 背景与目的:雷帕霉素是从吸水性链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)发酵液中提取,最近研究发现雷帕霉素具有免疫抑制作用和广泛的抗肿瘤作用.本研究主要探讨Caspase-3在雷帕霉素诱导肝癌细胞BEL-7402凋亡中的作用.方法:以不同浓度(5、10、20、30、40、50 nmol/L)的雷帕霉素作用于BEL-7402细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡形态学变化,采用Caspase-3试剂盒和Western blot蛋白电泳测定Caspase-3活性.结果:雷帕霉素可显著抑制BEL-7402细胞的生长,诱导细胞发生凋亡,具有量-效与时-效关系;雷帕霉素作用BEL-7402细胞48 h后,Hoechst 33258荧光染色可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征;凋亡过程中Caspase-3酶原蛋白的激活,出现20 ku亚单位,Caspase-3特异性抑制剂z-DEVD-FMK能阻断凋亡的发生.结论:雷帕霉素能抑制BEL-7402细胞的生长,诱导细胞凋亡发生,Caspase-3酶的激活在雷帕霉素诱导细胞凋亡机制中起到重要作用.
ISSN:1000-467X
DOI:10.3321/j.issn:1000-467X.2006.12.010