Comparison of “Gen-Probe” DNA probe and PCR for detection of Listeria monocytogenes in naturally contaminated soft cheese and semi-soft cheese

• Published in: Research in microbiology Vol. 144; no. 1; pp. 47 - 54
• Main Authors: Niederhauser, C, Höfelein, C, Lüthy, J, Kaufmann, U, Bühler, H.-P, Candrian, U
• Format: Journal Article
• Language: English
• Published: Paris Elsevier SAS 1993; Elsevier
• Subjects: Aliment; Biological and medical sciences; Cheese; Cheese, Natural contamination, Enrichment steps; Contamination naturelle; Culture Media; DNA probe; DNA Probes - genetics; Etapes d'enrichissement; Food; Food industries; Food Microbiology; Fromages; Fundamental and applied biological sciences. Psychology; In Situ Hybridization; In Vitro Techniques; Listeria monocytogenes; Listeria monocytogenes - genetics; Listeria monocytogenes - isolation & purification; PCR; Polymerase Chain Reaction - methods; Sonde ADN; Cheese, Natural contamination, Enrichment steps; PCR; Fromages; Polymerase chain reaction; Semi-hard cheese; DNA; Soft cheese; Listeria monocytogenes; Bacteria; Identification; Molecular probe; Method; Detection; Contamination
• ISSN: 0923-2508; 1769-7123
• DOI: 10.1016/0923-2508(93)90214-M

A comparison was made of three approaches for the detection of Listeria monocytogenes in naturally contaminated soft cheese and semi-soft cheese after enrichment. Enrichment broths were tested by plating them onto different selective agars, by “Gen Probe” DNA hybridization and by the polymerase chain reaction (PCR). Based on two-step enrichment, all three approaches showed high specificities (90 % or more) in detecting L. monocytogenes. In contrast, the sensitivity of the Gen-Probe test was low (33 % or less), whereas high sensitivities were obtained with selective plating and PCR (83 % or more). Based on one-step enrichment, specificities again were high for selective plating and PCR assay (100 %), whereas for the Gen-Probe assay the specificity was lower (88 % or more). The best sensitivities were observed with selective plating (67 %) and PCR (75 %). In terms of sensitivity, specificity and analysis time, PCR applied to a two-step enrichment was the most powerful assay for detecting L. monocytogenes in soft and semi-soft cheese. Trois méthodes de détection de Listeria monocytogenes dans des fromages à pâte molle et mi-dure, contaminés, ont été comparées après enrichissement, Nous-avons testé les milieux liquides d'enrichissement, étalés sur différents milieux sélectifs gélosés; nous avons utilisé l'hybridisation d'ADN (“Gen-Probe”) et la PCR (polymerase chain reaction). Les trois méthodes ont une spécificité élevée (⩾ 90 %) pour la détection de L. monocytogenes après enrichissement en deux étapes. D'autre part, la sensibilité du test génétique (Gen-Probe) est faible (⩽ 33 %) comparé à la sensibilité élevée obtenue avec les milieux sélectifs et la méthode PCR (⩾ 83 %). Dans l'enrichissement en une étape, seuls les milieux sélectifs et la PCR ont une spécificité élevée (100 %); au contraire, la spécificité du test génétique est plus basse (⩾ 88 %). Grâce aux milieux sélectifs (67 %) et à la méthode PCR (75 %) nous avons obtenu les meilleures sensibilités. Si nous considérons la sensibilité, la spécificité et le temps requis, la PCR avec enrichissement en deux étapes est la méthode la plus efficace pour la détection de L. monocytogenes dans les fromages à pâte molle et mi-dure.