Recent aspects of genetic manipulation in Bacillus thuringiensis

• Published in: Biochimie Vol. 67; no. 1; pp. 91 - 99
• Main Authors: Lereclus, Didier, Lecadet, Marguerite-M., Klier, André, Ribier, Jacques, Rapoport, Georges, Dedonder, Raymond
• Format: Journal Article
• Language: English
• Published: France Elsevier Masson SAS 1985; Elsevier
• Subjects: Bacillus thuringiensis; Bacillus thuringiensis - genetics; Bacterial Proteins - genetics; Bacterial Toxins; Base Sequence; clonage des gènes; cloning; Cloning, Molecular; conjugaison; Conjugation, Genetic; crystal protein; DNA Restriction Enzymes; DNA Transposable Elements; DNA, Bacterial - genetics; Endotoxins; Enterococcus faecalis - genetics; gene cloning; genes; Genes, Bacterial; genetic engineering; Hemolysin Proteins; Life Sciences; mating; Nucleic Acid Hybridization; Plasmids; protéine du cristal; reviews; transposon; élément transposable; transposon; conjugaison; gene cloning; clonage des gènes; protéine du cristal; élément transposable; crystal protein; mating
• ISSN: 0300-9084; 1638-6183
• DOI: 10.1016/S0300-9084(85)80234-0

Le plasmide transmissible pAMβ1 a été transféré, par un mécanisme assimilable à la conjugaison, de Streptococcus faecalis à différentes souches de Bacillus thuringiensis. Un plasmide hybride résultant de l'insertion in vivo d'une séquence de 3 Md a été isolé à partir d'un transconjugant. Ce fragment (séquence Th) présente des homologies avec des plasmides hôtes provenant de différents sérotypes. Le transfert réciproque du plasmide β entre B. thuringiensis et S. faecalis a également été démontré. La comparaison des cartes de restriction des gènes du cristal d'origine plasmidique et chromosomique issus de différents sérotypes, dont 6 ont été clonés chez E. coli, montre l'existence de 2 types de gènes dont la région correspondant à la partie N-terminale de la protéine est conservée, et qui diffèrent essentiellement dans la partie C-terminale. L'élément transposable Th a été observé dans plusieurs cas associé au gène du cristal sur le même plasmide hôte, et un modèle d'organisation structurale de l'ensemble est proposé. The conjugative plasmid pAMβ1 was transferred from Streptococcus faecalis to several strains of Bacillus thuringiensis by a filter-mating process. From a transconjugant clone of B. thuringiensis a hybrid plasmid resulting from an in vivo insertion into pAMβ1 of a 3 Md DNA sequence was isolated. This 3 Md DNA molecule (Th sequence) is related to several host plasmids found in different serotypes of B. thuringiensis. A reciprocal conjugation-like process involving the transfer of pAMβ1 from B. thuringiensis to S. faecalis was also demonstrated. The comparison of the restriction maps of the crystal genes from plasmid and chromosomal origins of different serotypes, six of which having been cloned in E. coli, revealed the existence of two classes of genes which are very similar in the map corresponding to the N-terminal part of the protein, and which differ essentially in the 3' region. The presence of the transposon-like Th sequence was found in several cases associated with the crystal gene in the same host plasmid, and a model for their structural organization is proposed.