Xylanase production by Trichoderma harzianum rifai by solid state fermentation on sugarcane bagasse

• Published in: Brazilian journal of microbiology Vol. 33; no. 1; pp. 67 - 72
• Main Authors: Rezende, Maria Inês(CCB Programa de Mestrado em Microbiologia ,Universidade Estadual de Londrina CCS-PALD Setor de Toxicologia,Universidade Norte do Paraná), Barbosa, Aneli de Melo(Departamento de Bioquímica Setor CCE), Vasconcelos, Ana Flora Dalberto(Universidade Norte do Paraná ,Departamento de Bioquímica Setor CCE), Endo, Asae Sakurada(Departamento de Bioquímica Setor CCE)
• Format: Journal Article
• Language: English; Portuguese
• Published: São Paulo Sociedade Brasileira de Microbiologia 2002; Springer Nature B.V
• Subjects: bagaço de cana; fermentação em fase sólida; MICROBIOLOGY; solid state fermentation; sugarcane bagasse; Trichoderma harzianum; xilanase; xylanase; Trichoderma harzianum; fermentação em fase sólida; sugarcane bagasse; solid state fermentation; xilanase; xylanase; bagaço de cana
• ISSN: 1517-8382; 1678-4405; 1678-4405; 1517-8382
• DOI: 10.1590/S1517-83822002000100014

Sugarcane bagasse was used as substrate for xylanase production by means of a strain of Trichoderma harzianum Rifai isolated from decaying Aspidosperma sp. (peroba) wood. The bagasse was washed, dried, milled and wetted with minimal salts medium and the cultures grown at 28 ± 2ºC for 7 days. Two extraction methods were tested for enzyme recovery: (A) Tween 80, 0.1% (v/v), in physiological saline, and (B) 50mM sodium acetate buffer, pH 5.0, under agitation (180rpm) for 15, 30 and 60min. After a single extraction, both extraction methods recovered an average of 15U/ml of xylanase activity, independent on the time of shaking. A second and third extraction recovered 10.4 and 6.6U/ml xylanase, respectively. The effect of volume size for extraction, and sugarcane bagasse concentration, on xylanase production were also investigated. The growth profile of Trichoderma harzianum was followed over 20 days on 14% (w/v) bagasse, and highest xylanase activity (288U/ml) appeared on the seventh day. The enzymatic extract after precipitation with ammonium sulphate was submitted to electrophoresis on polyacrylamide gels and showed 4 protein-staining bands, one of which exhibited xylanase activity. Bagaço de cana-de-açúcar foi utilizado como substrato para a produção de xilanase pelo Trichoderma harzianum Rifai, isolado previamente de peroba (Aspidosperma sp) em decomposição. Após ter sido lavado, seco e moído, o bagaço foi umedecido com meio mínimo de Vogel e autoclavado. Dois métodos de extração foram avaliados para recuperação da enzima: (A) Tween 80 0,1% em salina fisiológica (v/v) e (B) tampão acetato pH 5 (50mM) sob agitação (180rpm) durante 15, 30 e 60 minutos. Em média, foram recuperados 15U/ml de atividade xilanásica com ambos os extratores, após uma única extração, independente do tempo de agitação. Uma segunda e terceira reextrações recuperaram 10,4 e 6,6U/ml, respectivamente. O efeito de diferentes volumes de extração e a concentração de bagaço de cana para a produção da xilanase também foram investigados. A curva de crescimento de Trichoderma harzianum foi avaliada durante 20 dias e a maior atividade xilanásica (288U/ml) foi obtida no sétimo dia de cultivo. O extrato enzimático, após precipitação com sulfato de amônio, foi submetido à eletroforese em gel de poliacrilamida e apresentou 4 bandas de proteína, das quais apenas uma demonstrou atividade xilanásica.