Semen cryopreservation of Piau swine breed submited to three freezing protocols

• Published in: Revista brasileira de zootecnia Vol. 41; no. 4; pp. 914 - 922
• Main Authors: Barros, Maurício Hoshino da Costa, Shiomi, Hugo Hideki, Amorim, Lincoln da Silva, Guimarães, Simone Eliza Facioni, Lopes, Paulo Sávio, Siqueira, Jeanne Broch, Guimarães, José Domingos
• Format: Journal Article
• Language: English; Portuguese
• Published: Sociedade Brasileira de Zootecnia 01.04.2012
• Subjects: AGRICULTURE, DAIRY & ANIMAL SCIENCE; VETERINARY SCIENCES; espermatozoides; varrões; spermatozoa; intra-uterine insemination; boars; inseminação intra-uterina
• ISSN: 1516-3598; 1806-9290; 1516-3598
• DOI: 10.1590/S1516-35982012000400012

The objective of this study was to verify the effect of three protocols of cryopreservation on the sperm viability post-thawing of swine from the Piau breed (Sus scrofa), by means of evaluation assays in vitro and in vivo. Twenty-two ejaculates of 5 adult males of the Piau breed trough the gloved-hand method. In order to verify the sperm viability of the raw semen and post-thawing, the following traits were evaluated: sperm motility and vigor, hypoosmotic test, supra-vital color test and percentage of normal acrosomes. To freezing, the ejaculates were fractioned and submitted in: method 1, method of freezing recommended by Fürst et al. (2005), modified according to media extender; method 2, recommended by Fürst et al. (2005), modified according to the cooling curve; and method 3, recommended by Ohata et al. (2001). To test the in vivo fertility of the frozen/thawed semen, 23 intra-uterine (post-cervical) inseminations were performed in 14 females of the Piau breed, with semen from method 3. The mean values obtained with the use of methods 1 and 2 and post-thawing were inferior to those obtained with method 3. Four adult sows got pregnant (28.6% fertility rate). The freezing method recommended by Ohata et al. (2001), with balance period of 90 minutes at 22-26 ºC, enables higher results of in vitro sperm viability in comparison with the two other methods. The absence of balance period of method 1 and the cooling curve utilized in protocol 2 affect negatively the parameters of sperm viability evaluated in the present study. In spite of the satisfactory results in vitro for the freezing of semen with the utilization of method 3, it presents low fertility rate (28.6%). Objetivou-se verificar o efeito de três protocolos de criopreservação sobre a viabilidade espermática pósdescongelamento de suínos da raça Piau (Sus scrofa), por meio de testes de avaliação in vitro e in vivo. Foram coletados 22 ejaculados de 5 machos adultos da raça Piau por meio do método da mão enluvada. Para verificar a viabilidade espermática do sêmen in natura e pós-descongelamento, foram avaliados a motilidade e o vigor espermático, o teste hiposmótico, a coloração supra-vital e a porcentagem de acrossomas normais. Para o congelamento, os ejaculados foram fracionados e submetidos em: protocolo 1, método de congelamento preconizado por Fürst et al. (2005), modificado quanto aos meios diluentes; protocolo 2, método preconizado por Fürst et al. (2005), modificado quanto à curva de resfriamento; e protocolo 3, método preconizado por Ohata et al. (2001). Para testar a fertilidade in vivo do sêmen congelado/descongelado, foram realizadas 23 inseminações intrauterinas (pós-cervicais) em 14 fêmeas da raça Piau com o sêmen proveniente do protocolo 3. Os valores médios obtidos com o uso dos protocolos 1 e 2 pós-descongelamento foram inferiores aos obtidos com o protocolo 3. Quatro porcas adultas ficaram gestantes (28,6% de taxa de fertilidade). O protocolo de congelamento preconizado por Ohata et al. (2001), com período de equilíbrio de 90 minutos a 22-26 ºC, permite obter melhores resultados de viabilidade espermática in vitro em comparação aos outros dois protocolos. A ausência de período de equilíbrio do protocolo 1 e a curva de resfriamento utilizada no protocolo 2 afetam negativamente os parâmetros de viabilidade espermática avaliados no presente estudo. Apesar dos resultados satisfatórios in vitro para o congelamento de sêmen com a utilização do protocolo 3, o mesmo apresenta baixa taxa de fertilidade (28,6%).