Extração de DNA para análise da amelogenina em amostras fixadas em formalina, incluídas em parafina e armazenadas por 1 e 5 anos no Departamento de Patologia da Universidade Federal de São Paulo
O uso da biologia molecular em amostras fi xadas em formalina e incluídas em parafi na (FFPE) vem crescendo, e a melhoria nos métodos de obtenção do DNA para sua análise é necessária. O objetivo deste estudo foi avaliar o DNA extraído de blocos de tecidos FFPE (fígado, baço e cérebro não tumorais), ob...
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Published in | Saúde ética & justiça Vol. 18; no. spe; p. 39 |
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Main Authors | , |
Format | Journal Article |
Language | English |
Published |
Universidade de Sao Paulo
26.12.2013
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Subjects | |
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Summary: | O uso da biologia molecular em amostras fi xadas em formalina e incluídas em parafi na (FFPE) vem crescendo, e a melhoria nos métodos de obtenção do DNA para sua análise é necessária. O objetivo deste estudo foi avaliar o DNA extraído de blocos de tecidos FFPE (fígado, baço e cérebro não tumorais), obtidos de necropsia, 8 a 24 horas post mortem, utilizando três métodos de extração de DNA (kit comercial, fenolclorofórmio e Salting-Out). Foram realizadas as PCRs dos genes da actina (136pb), amelogenina humana (AMEL 212-218pb) e STRs (100-400pb) para avaliar a efi cácia do método de extração de DNA e determinar o sexo dos indivíduos. Foram utilizados 28 casos arquivados (1 e 5 anos) e 12 recentes, sendo analisadas 10 amostras de cada um dos tecidos. O kit comercial apresentou maior grau de pureza, resultados reprodutíveis e consistentes na amplifi cação por PCR nos genes da -actina e AMEL e na análise por STR. Este estudo fornece uma compreensão dos desafi os envolvendo amostras FFPE, e esclareceu novas estratégias para análises moleculares neste tipo de material. |
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ISSN: | 1414-218X 2317-2770 |
DOI: | 10.11606/issn.2317-2770.v18ispep39-44 |