Método para amplificar cultivos primarios de células epiteliales bronquiales

• Published in: Archivos de bronconeumología Vol. 41; no. 9; pp. 524 - 527
• Main Authors: Margarit, G., Belda, J., Casan, P., Sanchis, J.
• Format: Journal Article
• Language: Spanish
• Published: Elsevier Espana 2005; Doyma
• Subjects: Amplificación; Bronchial epithelial cells; Citoqueratina 7; Cultivos primarios; Culture expansion; Cytokeratin 7; Células epiteliales bronquiales; Explantes; Explants; Primary cultures; Explants; Bronchial epithelial cells; Citoqueratina 7; Cultivos primarios; Explantes; Primary cultures; Cytokeratin 7; Células epiteliales bronquiales; Culture expansion; Amplificación
• ISSN: 0300-2896
• DOI: 10.1157/13078655

Los cultivos celulares son un buen modelo para el estudio de las enfermedades pulmonares, pero son difíciles de reproducir y producen un número limitado de células. El objetivo de este estudio ha sido desarrollar un método que incrementase la producción de células epiteliales bronquiales (CEB) humanas en cultivos primarios. Se procesó un total de 12 muestras (9 procedentes de muestras quirúrgicas y 3 de biopsias endoscópicas) en placas recubiertas de colágeno tipo I con medio suplementado para CEB. Al iniciarse la proliferación celular a su alrededor, los explantes se extrajeron y subcultivaron sucesivamente. Las células restantes se dejaron proliferar y se tripsinizaron tras alcanzar más del 50% de confluencia. Se valoraron el número de células obtenidas, la viabilidad y la citoqueratina 7. El número total de células obtenidas con este método superó en una media de 3 veces el número de CEB humanas obtenidas en cultivos primarios simples. El número máximo de subcultivos fue de 5, la viabilidad media (± desviación estándar) fue de 91,9 ± 11,7% y el porcentaje de células positivas para la citoqueratina 7 del 30,71 ± 10,68%. El método descrito para amplificar cultivos primarios de CEB permite incrementar la producción de células obtenidas. Cell cultures provide a good model for studying lung diseases but they are difficult to reproduce and the number of cells obtained is limited. The aim of this study was to develop a way to increase the production of human bronchial epithelial cells (BEC) in primary cultures. A total of 12 samples (9 from surgical specimens and 3 from endoscopic biopsies) were processed on plates coated with type I collagen with growth medium supplemented for BEC. When cell proliferation started, the explants were removed for successive subculturing. The remaining cells were left to proliferate and were trypsinized after 50% confluence. We recorded the number of cells obtained, cell viability, and the percentage positive for cytokeratin 7. The total number of cells obtained by this method was 3-fold the number of human BEC obtained with simple primary cultures. The maximum number of subcultures was 5, mean (SD) cell viability was 91.9% (11.7%), and the percentage of cells positive for cytokeratin 7 was 30.71% (10.68%). The described method for expanding primary BEC cultures increases cell production.