Avaliação de teste imunoenzimático indireto (ELISAi) para anticorpos vacinais anti Brucella abortus B19

• Published in: PUBVET Vol. 14; no. 12; pp. 1 - 9
• Main Authors: Zanini, Marcos, Lima Lossano, Diana Maria, Silva Souza, Ligia Isabelle, Gonçalves Furtado de Melo, Lhydyany, Madureira, Ana Paula, Molinari Donatele, Dirlei
• Format: Journal Article
• Language: Portuguese; English
• Published: Editora MV Valero 01.12.2020
• Subjects: brucelose; diagnóstico; sorologia
• ISSN: 1982-1263; 1982-1263
• DOI: 10.31533/pubvet.v14n12a716.1-9

La brucelosis bovina es una enfermedad infectocontagiosa causada tradicionalmente por la bacteria Brucella abortus. El diagnóstico por métodos serológicos y la vacunación con la cepa B. abortus B19 son las formas convencionales y tradicionales de control de enfermedades. La prueba de detección serológica oficial estándar en Brasil es el Antígeno Tamponado Acidificado (AAT), sin embargo, no se acepta internacionalmente y se necesitan más pruebas para su validación al exportar animales. En vista de lo anterior, el objetivo fue evaluar y validar un protocolo ELISA indirecto para suero de animales vacunados, teniendo moléculas solubles extraídas de una vacuna comercial de la muestra de B. abortus B19 como el antígeno para sensibilizar de la placa de poliestireno. Paralelamente, la prueba AAT se utilizó como control para los resultados obtenidos. Con este fin, se recogió suero de 22 novilla vacunadas con B19 en propiedades rurales del estado de Espírito Santo, Brasil, en los tiempos máximos de ocho, 12 y 16 meses después de la vacunación y se realizaron pruebas indirectas de ELISA y AAT para verificar la presencia cualitativa de anticuerpos. Los resultados se evaluaron utilizando las pruebas estadísticas chi-cuadrado de dos variables para verificar la asociación entre los resultados. Se calculó el índice de concordancia de Kappa, así como la sensibilidad y especificidad, y los valores predictivos positivos y negativos. El protocolo ELISAi utilizando antígenos de B. abortus solubles de este experimento mostró sensibilidad (0,7826) y especificidad (0,3023) alcanzando el objetivo de este experimento para detectar anticuerpos anti-Brucella en novillas vacunadas con B19 en los tiempos de ocho, 12 y 16 meses después de la vacunación. Sin embargo, se observó que no existe una asociación significativa entre los resultados de las pruebas AAT y ELISAi como se muestra en la prueba de chi-cuadrado para la tabla de contingencia 2x2 (χ2 = 0,545, p = 0,46). La brucelosis bovina es una enfermedad infectocontagiosa causada tradicionalmente por la bacteria Brucella abortus. El diagnóstico por métodos serológicos y la vacunación con la cepa B. abortus B19 son las formas convencionales y tradicionales de control de enfermedades. La prueba de detección serológica oficial estándar en Brasil es el Antígeno Tamponado Acidificado (AAT), sin embargo, no se acepta internacionalmente y se necesitan más pruebas para su validación al exportar animales. En vista de lo anterior, el objetivo fue evaluar y validar un protocolo ELISA indirecto para suero de animales vacunados, teniendo moléculas solubles extraídas de una vacuna comercial de la muestra de B. abortus B19 como el antígeno para sensibilizar de la placa de poliestireno. Paralelamente, la prueba AAT se utilizó como control para los resultados obtenidos. Con este fin, se recogió suero de 22 novilla vacunadas con B19 en propiedades rurales del estado de Espírito Santo, Brasil, en los tiempos máximos de ocho, 12 y 16 meses después de la vacunación y se realizaron pruebas indirectas de ELISA y AAT para verificar la presencia cualitativa de anticuerpos. Los resultados se evaluaron utilizando las pruebas estadísticas chi-cuadrado de dos variables para verificar la asociación entre los resultados. Se calculó el índice de concordancia de Kappa, así como la sensibilidad y especificidad, y los valores predictivos positivos y negativos. El protocolo ELISAi utilizando antígenos de B. abortus solubles de este experimento mostró sensibilidad (0,7826) y especificidad (0,3023) alcanzando el objetivo de este experimento para detectar anticuerpos anti-Brucella en novillas vacunadas con B19 en los tiempos de ocho, 12 y 16 meses después de la vacunación. Sin embargo, se observó que no existe una asociación significativa entre los resultados de las pruebas AAT y ELISAi como se muestra en la prueba de chi-cuadrado para la tabla de contingencia 2x2 (χ2 = 0,545, p = 0,46). A brucelose bovina é uma doença infectocontagiosa provocada tradicionalmente pela bactéria Brucella abortus. O diagnóstico por métodos sorológicos e a vacinação com a cepa B. abortus B19 são as formas convencionais e tradicionais de controle da doença. O teste sorológico de triagem oficial padrão no Brasil é o Antígeno Acidificado Tamponado (AAT), entretanto não é aceito internacionalmente sendo necessários outros testes para sua validação quando de exportação de animais. Diante do exposto, objetivou-se avaliar e validar um protocolo de ELISA indireto para soro de animais vacinados, tendo como antígeno para sensibilização da placa de poliestireno moléculas solúveis extraídas de uma vacina comercial de B. abortus amostra B19. Em paralelo, o teste AAT foi utilizado como controle para os resultados obtidos. Para tanto, foram coletados soros de 22 novilhas vacinadas com B19 em propriedades rurais da região do estado do Espírito Santo, Brasil nos tempos máximos de oito, 12 e 16 meses após vacinação e submetidos aos testes ELISA indireto e AAT para verificar a presença qualitativa de anticorpos. Os resultados foram avaliados pelos testes estatísticos de qui-quadrado de duas variáveis para verificar associação entre os resultados. Calculou-se o índice de concordância Kappa e também sensibilidade e especificidade, e valores preditivos positivo e negativo. O protocolo de ELISAi utilizando antígenos solúveis de B. abortus deste experimento mostrou sensibilidade (0,7826) e especificidade (0,3023) atingindo o objetivo deste experimento para detecção de anticorpos anti-Brucella em novilhas vacinadas com B19 nos tempos de oito, 12 e 16 meses pós vacinação. Entretanto, observou-se que não existiu uma associação significativa entre os resultados dos testes AAT e ELISAi realizados como mostra o teste de qui-quadrado para tabela de contingência 2x2 (χ2=0,545, p=0,46).