P56 Influence des perfluorocarbures (PFCs) sur la préservation des îlots pancréatiques de rat in vitro

• Published in: Diabetes & metabolism Vol. 34; p. H58
• Main Authors: Maillard, E, Sanchez-Dominguez, M, Kleiss, C, Langlois, A, Beitiger, W, Vodouhé, C, Sencier, M.C, Krafft, M.P, Pinget, M, Belcourt, A, Sigrist, S
• Format: Journal Article
• Language: French
• Published: Elsevier Masson SAS 2008
• Subjects: Endocrinology & Metabolism; Internal Medicine
• ISSN: 1262-3636; 1878-1780
• DOI: 10.1016/S1262-3636(08)72968-9

Introduction L’hypoxie insulaire est hautement délétère et provoque une perte importante des îlots avant transplantation. Un nouvel outil, les perfluorocarbures utilisés dans le cadre de la préservation d’organe, a été testé en culture dans le but d’oxygéner les îlots. Matériels et méthodes Des cultures primaires d’îlots pancréatiques de rat (n = 6) ont été cultivées en présence ou non de 3,5 % (p/v) de PFC dans du milieu de culture. Après 1, 2, 3, et 5 jours de culture, la viabilité des îlots pancréatiques a été évaluée par coloration FDA/PI. La fonctionnalité des îlots a été déterminée par la mesure de la sécrétion d’insuline (ELISA) lors d’un test de stimulation au glucose. Enfin l’expression de la laminine, de la fibronectine et du collagène (RT-PCR, Western Blot et immunohistochimie) a permis l’étude de la matrice extracellulaire des îlots dans les différentes conditions de culture. Résultats La viabilité des îlots en présence ou non de PFC est comparable (80 % de cellules viables au sein de l’îlot) à tous les temps de l’étude. Par contre, l’étude de la fonctionnalité des îlots contrôles montre une diminution de l’index de stimulation au cours du temps (1,46 ± 0,07 à 2 jours, 1,15 ± 0,56 à 5 jours ; p < 0,01). L’apport de PFCs permet une préservation de cette fonctionnalité avec un index de stimulation qui demeure inchangé jusqu’à 5 jours de culture (2,84 ± 1,05). L’étude de la matrice extracellulaire montre que l’expression des protéines est plus faible dans les îlots cultivés en présence de PFCs après 24 heures de culture. L’analyse immunohistochimique montre une préservation de la matrice extracellulaire des îlots cultivés en présence de PFCs alors que cette même matrice semble détériorée dans les îlots contrôles. Après 5 jours de culture, on observe une fibrose des îlots cultivés seuls alors que les îlots cultivés en présence de PFCs ont conservé leur structure insulaire. Conclusion Nous avons montré que les PFCs permettent de lutter contre la fibrose insulaire à l’origine de la perte de fonctionnalité des îlots. L’utilisation des PFCs pour préserver les îlots in vitro avant transplantation semble donc être une nouvelle approche prometteuse.