Evaluación de la técnica PCR anidada para el diagnóstico de la esporotricosis experimental

• Published in: Revista iberoamericana de micología Vol. 29; no. 3; pp. 120 - 125
• Main Authors: Mendoza, Mireya, Brito, Ana, Schaper, Daniel Alejandro, Spooner, Vanesa Alexandra, Alvarado, Primavera, Castro, Aura, Fernández, Alexis
• Format: Journal Article
• Language: Spanish
• Published: Elsevier Espana 01.07.2012
• Subjects: Esporotricosis experimental; Experimental sporotrichosis; Infectious Disease; Nested polymerase chain reaction; Reacción anidada en cadena de la polimerasa; Serodiagnosis; Serodiagnóstico; Sporothrix schenckii; Sporothrix schenckii; Esporotricosis experimental; Experimental sporotrichosis; Nested polymerase chain reaction; Serodiagnóstico; Serodiagnosis; Reacción anidada en cadena de la polimerasa
• ISSN: 1130-1406
• DOI: 10.1016/j.riam.2011.09.002

ResumenAntecedentesLa esporotricosis causada por el hongo dimorfo Sporothrix schenckii puede presentar una gran diversidad de formas clínicas. El diagnóstico de laboratorio se lleva a cabo por estudio micológico y serológico. Muy pocos estudios se han enfocado a la evaluación de su diagnóstico molecular. ObjetivoEnsayar la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) anidada en el diagnóstico de la esporotricosis experimental en órganos de ratones y compararla con los estudios micológico y serológico.MétodosRatones BALB/c fueron inoculados con concentraciones crecientes de las 2 fases morfológicas del hongo. Los animales fueron sacrificados un mes después de la inoculación, evaluándose muestras de hígado, bazo, pulmón y testículo para el estudio micológico (examen directo y cultivo) y molecular por PCR anidada, y muestras de sangre para la captación de anticuerpos específicos contra S. schenckii por inmunodifusión doble. ResultadosLos resultados de patogenicidad con las diferentes concentraciones del hongo, y el aislamiento del mismo por cultivo mostraron pocas diferencias en el estudio de las muestras de los órganos infectados con las 2 fases morfológicas de S. schenckii. En las muestras de ratones inoculados con la fase micelial los porcentajes de positividad del cultivo y examen directo fueron mayores (100 y 37,5%), en comparación con los encontrados con los de levadura (73 y 2%). Sin embargo, en el diagnóstico molecular por PCR anidada, en estas últimas muestras, los porcentajes de positividad fueron mayores (75%), encontrándose con el micelio un 43% de resultados positivos. La detección de anticuerpos específicos fue positiva en el 100% de todos los grupos de ratones infectados. ConclusionesEn el estudio de la esporotricosis experimental en ratones, el cultivo demostró ser una herramienta de gran eficacia, así como también la detección de anticuerpos específicos, mientras que la prueba de PCR anidada y el estudio microscópico resultaron ser de de inferior valor diagnóstico.