マヨネーズからのReal-time PCRを用いた効果的なCoxiella burnetii 検出法の開発と都内流通マヨネーズのC. burnetii 汚染調査成績

• Published in: Shokuhin eiseigaku zasshi Vol. 47; no. 1; pp. 1 - 8
• Main Authors: 田部井, 由紀子, 鎌田, 信一, 矢野, 一好, 石崎, 直人, 仲真, 晶子, 平井, 昭彦, 諸角, 聖, 貞升, 健志, 金子, 誠二, 長谷川, 道弥, 甲斐, 明美, 新開, 敬行, 小田桐, 恵
• Format: Journal Article
• Language: Japanese
• Published: 公益社団法人 日本食品衛生学会 25.02.2006; 日本食品衛生学会
• Subjects: Q熱; コクシエラ菌; マヨネーズ; リアルタイムPCR
• ISSN: 0015-6426; 1882-1006
• DOI: 10.3358/shokueishi.47.1

市販マヨネーズ中の効率的なCoxiella burnetii 検出法を開発した．50 gのマヨネーズよりNaCl濃度2.0 mol/Lリン酸緩衝液で，分液漏斗を用い4回抽出を行いC. burnetii を含む分画を得た．得られた抽出液を20,000×g，60分間遠心後，遠心沈渣より市販の抽出キットを用いDNAを抽出し，抽出したDNAをcom1 遺伝子領域を標的とするrealtime-PCRにより定量した．C. burnetii Nine Mile株II相菌1×107個を用い，市販されている2種類のマヨネーズに添加後，抽出したDNAをcom1 遺伝子領域を標的とするrealtime-PCRにより定量し，回収率を求めたところ，回収率はそれぞれ 85.0±6.0%, 72.0±0.4%であった．また，検出限界はマヨネーズ50 g当たり500個であった．さらに，東京都内で市販されているマヨネーズ50製品を対象にnested-PCRおよびrealtime-PCRによる検査を実施した結果，C. burnetii 遺伝子を検出した例はなかった．