聚合酶链式反应技术快速检测原料乳中荧光假单胞菌

目的 利用聚合酶链式反应技术(polymerase chain reaction,PCR)技术建立一种快速、准确检测原料乳中最常见有害嗜冷微生物荧光假单胞菌的方法.方法 以荧光假单胞菌蛋白酶基因aprX为检测靶标,设计特异性PCR简并引物,建立原料乳中荧光假单胞菌PCR检测体系,对该体系的特异性及检出限进行评价.结果 筛选到特异性引物F3:5'-WSNGGNGGNGAYTTYCAYATGAC-3';R3:5'-RTCRTTNCCNCCNCCRTCCC-3',建立了最佳PCR检测体系:引物浓度0.5μmol/L、Taq DNA聚合酶添加量0.4μL、dNT...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Published in食品安全质量检测学报 Vol. 13; no. 15; pp. 4766 - 4772
Main Authors 步雨珊, 乔文君, 黄冬成, 刘银雪, 公丕民, 刘同杰, 张兰威, 易华西
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 中国海洋大学食品科学与工程学院, 青岛 266000%黑龙江大三源乳品机械有限公司, 哈尔滨 150001 2022
Subjects
聚合酶链式反应技术
荧光假单胞菌
嗜冷菌
原料乳
Online AccessGet full text
ISSN2095-0381

Cover

More Information
Summary:目的 利用聚合酶链式反应技术(polymerase chain reaction,PCR)技术建立一种快速、准确检测原料乳中最常见有害嗜冷微生物荧光假单胞菌的方法.方法 以荧光假单胞菌蛋白酶基因aprX为检测靶标,设计特异性PCR简并引物,建立原料乳中荧光假单胞菌PCR检测体系,对该体系的特异性及检出限进行评价.结果 筛选到特异性引物F3:5'-WSNGGNGGNGAYTTYCAYATGAC-3';R3:5'-RTCRTTNCCNCCNCCRTCCC-3',建立了最佳PCR检测体系:引物浓度0.5μmol/L、Taq DNA聚合酶添加量0.4μL、dNTPs浓度0.16 mmol/L、Mg2+浓度1.6 mmol/L,退火温度56.4℃,扩增35个循环.此检测方法对荧光假单胞菌具有特异性,检出限为2.57×103 CFU/mL.结论 本方法操作简便,特异性强,适用于快速检测原料乳中的荧光假单胞菌.
ISSN:2095-0381