抗真菌肽MAF-1A体外对近平滑念珠菌生物膜形成能力的影响、与生物膜结合及抑菌情况观察

• Published in: 山东医药 Vol. 60; no. 18; pp. 30 - 34
• Main Authors: 成荣, 李红凌, 胡方芳, 许强, 罗振华, 李伟
• Format: Magazine Article
• Language: Chinese
• Published: 贵州大学医学院,贵阳,550025%贵州省人民医院%贵州省人民医院 2020; 国家卫生健康委员会肺脏免疫性疾病诊治重点实验室%贵州医科大学附属医院
• Subjects: 近平滑念珠菌; 生物膜; 抗真菌肽MAF-1A; 抗菌肽; 抗菌活性
• ISSN: 1002-266X
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2020.18.008

R379.4; 目的 观察不同浓度抗真菌肽MAF-1A处理的近平滑念珠菌F1356生物膜形成能力及生物膜细胞活性.方法 取F1356菌体适量分5份,其中4份分别加入终浓度为0.3、0.6、0.9、1.2 mg/mL的MAF-1A,等量无菌水处理为空白对照,另取适量F1356分5份,其中4份分别加入0.3、0.6、0.9、1.2 mg/mL的氟康唑(FLC),设置无菌水处理为空白对照,经培养24 h时观察F1356生物膜形成能力(OD490nm值),倒置显微镜下观察F1356生物膜中的菌体密度及膜致密结构.体外培养F1356使其形成生物膜结构,加入0.6 mg/mL的FITC-MAF-1A培养,分别于培养1、3、6、12、24 h采用荧光标记技术观察MAF-1A与F1356生物膜结合情况.将F1356菌体分为5份,其中4份分别加入终浓度分别为0.3、0.6、0.9、1.2 mg/mL的MAF-1A,加入无菌水者为空白对照,培养24h后通过XTT细胞活性检测技术检测F1356生物膜细胞活性(OD450nm值).结果 与空白对照比较,0.6、0.9、1.2 mg/mL的MAF-1A处理的F1356生物膜形成能力降低(P≤0.05),镜下可见F1356生物膜中菌体密度减少,膜致密结构被破坏;与空白对照比较,0.6、0.9、1.2 mg/mL的FLC处理后F1356生物膜形成能力降低(P≤0.05),镜下可见0.6、0.9、1.2 mg/mL的FLC处理的F1356生物膜中菌体密度减少,膜致密结构被破坏.随培养时间延长,镜下可见黄绿色荧光信号逐渐增多,培养24h时可观察到生物膜内细胞存在大量黄绿色荧光信号.随MAF-1A浓度增加,F1356生物膜细胞活性逐渐降低(P均≤0.05).与对照组比较,0.3、0.6、0.9、1.2 mg/mL FLC处理的F1356生物膜活性降低(P均≤0.05),与0.3 mg/mL FLC比较,0.9、1.2 mg/mL FLC处理的F1356生物膜活性升高(P均≤0.05).结论 MAF-1A可抑制F1356的生物膜形成,且MAF-1A可与F1356生物膜结合进入生物膜细胞内聚集,2MIC浓度(0.6 mg/mL)即可抑制F1356生物膜的细胞活性.