多重实时RT-PCR快速检测新型甲型H1N1流感病毒

• Published in: 农业生物技术学报 Vol. 18; no. 2; pp. 352 - 355
• Main Authors: 潘朝思, 罗宝正, 薄清如, 莫秋华, 徐海聂, 沙才华, 廖秀云
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 珠海出入境检验检疫局,国家外来病检测重点实验室,珠海,519015 2010
• Subjects: H1N1亚型; 多重实时RT-PCR; 甲型流感病毒

R3; 从GenBank中获取新型甲型H1N1流感病毒(2009年流行株)HA和NA基因序列,通过多重序列比对之后,设计合成H1和N1基因特异性的引物和探针,用来建立新的甲型H1N1亚型流感病毒的多重实时RT-PCR检测方法.合成的两条荧光探针分别标记FAM和CY5荧光报告基团,荧光淬灭均使用BHQ基团.多重实时RT-PCR实验在ABl7500实时PCR仪上进行,经过40个循环的扩增之后,阳性对照出现标准的S型曲线,并且具有良好的特异性,可以很好地将新的甲型H1N1与传统的甲型H1N1以及H3N2、H5N1、H6N2和H9N2等流感病毒区分.多重实时RT-PCR可以检测到10个拷贝的模板,灵敏...