Dyskerin假尿苷合成酶1对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响研究
R739.41; 目的 探讨Dyskerin假尿苷合成酶1(Dyskerin pseudouridine synthase 1,DKC1)对人脑胶质瘤U87细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能的作用机制.方法 采用Control siRNA、DKC1 siRNA分别转染人脑胶质瘤U87细胞;Western blot检测DKC1蛋白表达水平及AKT、p-AKT、p70S6K、p-p70S6K蛋白表达水平的影响,基质金属蛋白酶(matrix metalloprotein,MMP)-2、MMP-9的表达量.细胞计数试剂盒(CCK-8)、细胞增殖实验检测DKC1 siRNA对人脑胶质瘤U87细胞增殖的影...
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Published in | 临床神经外科杂志 Vol. 17; no. 3; pp. 292 - 297 |
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Main Authors | , , , , , , |
Format | Journal Article |
Language | Chinese |
Published |
徐州医科大学附属医院, 徐州,221000%徐州医科大学麻醉学院
2020
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Summary: | R739.41; 目的 探讨Dyskerin假尿苷合成酶1(Dyskerin pseudouridine synthase 1,DKC1)对人脑胶质瘤U87细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能的作用机制.方法 采用Control siRNA、DKC1 siRNA分别转染人脑胶质瘤U87细胞;Western blot检测DKC1蛋白表达水平及AKT、p-AKT、p70S6K、p-p70S6K蛋白表达水平的影响,基质金属蛋白酶(matrix metalloprotein,MMP)-2、MMP-9的表达量.细胞计数试剂盒(CCK-8)、细胞增殖实验检测DKC1 siRNA对人脑胶质瘤U87细胞增殖的影响;细胞划痕实验及transwell迁移、侵袭实验检测细胞的迁移、侵袭能力.结果 (1)通过CCK-8实验发现下调DKC1基因后,与Ctrl siRNA组比较,在24 h、48 h、72 h、96 h时间点DKC1组胶质瘤U87细胞OD值明显降低,差异有统计学意义(P<0.01-0.001).(2)划痕实验显示:下调DKC1基因后,与Ctrl siRNA组比较,在0 h、24 h、48 h时间点DKC1组胶质瘤U87细胞迁移距离小,差异有统计学意义(P<0.01-0.001).(3)transwell实验显示:下调DKC1基因后,与Ctrl siRNA组比较,DKC1组胶质瘤U87细胞迁移和侵袭细胞个数均明显减少,差异有统计学意义(均P<0.01).(4)Western blot实验显示:与Ctrl siRNA组相比,DKC1组的基因序列的蛋白表达明显降低(P<0.05).下调DKC1基因后,DKC1组的AKT、pAKT蛋白表达较Ctrl siRNA组变化不明显,差异无统计学意义(均P>0.05),说明下调胶质瘤U87细胞中DKC1基因表达对于AKT、pAKT的表达无明显影响;DKC1组p70S6K、p-p70S6K蛋白表达较Ctrl siRNA组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05-0.01),表明在U87细胞中下调DKC1基因对p70S6K、p-p70S6K的表达水平有明显的抑制作用.DKC1组MMP2、MMP9蛋白表达较Ctrl siRNA组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05-0.01),表明在U87细胞中下调DKC1基因对MMP2、MMP9的蛋白表达水平有明显的抑制作用.结论 (1)DKC1对胶质瘤生物学行 |
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ISSN: | 1672-7770 |
DOI: | 10.3969/j.issn.1672-7770.2020.03.011 |