胶质瘤条件培养基促进巨噬细胞糖酵解及表型转化

R96; 目的 初步探索胶质瘤条件培养基诱导巨噬细胞糖酵解代谢与促癌介质表达的作用与机制.方法 以经过缺氧与小鼠胶质瘤细胞系GL261条件培养基(GCM)诱导后的骨髓来源巨噬细胞(BMDM)(GCM-BMDM)为体外胶质瘤相关巨噬细胞(GAMs)模型,通过qPCR检测GCM-BMDM中M1与M2促癌介质、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与糖酵解相关代谢酶基因mRNA水平;采用Seahorse细胞能量测定方法检测GCM-BMDM细胞外酸化速率(ECAR);通过Western blot检测信号传导与转录激活因子6(STAT6)、信号传导与转录激活因子3(STAT3)及其磷酸化形式p-STAT6、...

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Published in基础医学与临床 Vol. 44; no. 5; pp. 599 - 605
Main Authors 张迪雅, 李云帆, 郭泓江, 仇佳星, 王钰铖, 鞠瑞, 郭磊
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院药理系,北京 100005 2024
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ISSN1001-6325
DOI10.16352/j.issn.1001-6325.2024.05.0599

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Summary:R96; 目的 初步探索胶质瘤条件培养基诱导巨噬细胞糖酵解代谢与促癌介质表达的作用与机制.方法 以经过缺氧与小鼠胶质瘤细胞系GL261条件培养基(GCM)诱导后的骨髓来源巨噬细胞(BMDM)(GCM-BMDM)为体外胶质瘤相关巨噬细胞(GAMs)模型,通过qPCR检测GCM-BMDM中M1与M2促癌介质、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与糖酵解相关代谢酶基因mRNA水平;采用Seahorse细胞能量测定方法检测GCM-BMDM细胞外酸化速率(ECAR);通过Western blot检测信号传导与转录激活因子6(STAT6)、信号传导与转录激活因子3(STAT3)及其磷酸化形式p-STAT6、p-STAT3蛋白水平.结果 GCM刺激BMDM Hif-1α与多种M1、M2促癌介质mRNA表达(P<0.01);GCM上调BMDM多种糖酵解基因mRNA表达(P<0.01),升高糖酵解水平(P<0.001),加入乳酸脱氢酶抑制剂stiripentol(STP)处理后糖酵解水平降低(P<0.05);STP下调GCM-BMDM Hif-1α与促癌介质Il-1β、Il-6、Ido与 Cd163 mRNA 水平(P<0.01);STP 下调 GCM-BMDM p-STAT3/STAT3 与 p-STAT6/STAT6 比值(P<0.05).结论 GCM增加糖酵解代谢,促进HIF-1α、STAT3与STAT6介导的转录调控机制以诱导GAMs的促癌表型.STP能有效抑制GAMs糖酵解并降低GAMs促癌介质的转录表达水平.
ISSN:1001-6325
DOI:10.16352/j.issn.1001-6325.2024.05.0599