陆川猪ANKRD1基因克隆及其表达差异分析

• Published in: 南方农业学报 Vol. 51; no. 6; pp. 1470 - 1477
• Main Authors: 潘鹏丞, 焦迪, 谢婉, 陈宝剑, 关志惠, 谢炳坤
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 广西畜牧研究所/广西家畜遗传改良重点实验室,南宁 530001 2020; 广西大学动物科学技术学院,南宁,530004%广西畜牧研究所/广西家畜遗传改良重点实验室,南宁,530001%广西大学动物科学技术学院,南宁 530004
• Subjects: 克隆; 生物信息学; 组织表达谱; ANKRD1基因; 陆川猪
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2020.06.029
• ISSN: 2095-1191

S828.89; [目的]克隆陆川猪心肌锚蛋白重复域1基因(ANKRD1),并进行生物信息学及组织表达谱分析,为研究ANKRD1在陆川猪机体内的功能作用提供参考依据.[方法]根据NCBI已公布的野猪ANKRD1基因序列(NM_213922.1)设计特异性引物,采用TRIzol法提取陆川猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背最长肌和皮下脂肪的总RNA,反转录合成cDNA,并以此为模板进行ANKRD1基因克隆,通过MegAlign、Protaram、Protscale、MHMM Server和Sig-nalP等在线分析软件进行生物信息学分析,最后以实时荧光定量PCR检测ANKRD1基因在陆川猪各组织中的表达情况.[结果]陆川猪ANKRD1基因蛋白编码区(CDS)序列全长960 bp,编码319个氨基酸残基,与NCBI已公布野猪ANKRD1基因(NM_213922.1)的CDS序列存在4处碱基突变,但均为同义突变,二者的ANKRD1氨基酸序列同源性为99.6％.陆川猪ANKRD1基因编码蛋白分子量为36125.70 Da,理论等电点(pI)为7.09,属于稳定蛋白,其二级结构中α-螺旋占46.39％、无规则卷曲占39.81％、β-转角占9.09％、延伸链占4.70％;陆川猪ANKRD1蛋白不存在跨膜结构,也无信号肽,有多个磷酸化位点.陆川猪ANKRD1基因在其心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背最长肌和皮下脂肪等7个组织中均有表达,其中以心脏中的相对表达量最高,显著高于在其他组织中的相对表达量(P<0.05,下同),在脾脏中的相对表达量最低,显著低于在心脏、肝脏、肺脏和背最长肌中的相对表达量.[结论]ANKRD1基因在陆川猪的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背最长肌和皮下脂肪等组织中均有表达,且存在明显差异,故推测ANKRD1基因在不同组织中发挥不同作用.