분화된 3T3-L1 세포에서 로스팅 차가버섯의 항비만 효능 평가

• Published in: 강원 농업생명환경연구 Vol. 29; no. 3; pp. 193 - 201
• Main Authors: 김나은, Kim N. E, 이미옥, M. O. Lee, 장미희, M. H. Jang, 정병희, B. H. Chung
• Format: Journal Article
• Language: Korean
• Published: 강원대학교 농업생명과학연구원 31.12.2017
• Subjects: Anti-obesity; Inonotus obliquus; Lipid accumulation; Roasting
• ISSN: 2233-8322

본 연구에서는 로스팅에 따른 차가버섯의 항비만 기능성 증진 효과를 확인하기 위하여 서로 다른 조건에서 차가버섯을 로스팅하고 그 추출분말을 제작한 후 지방전구세포인 3T3-L1의 세포독성을 확인하고 분화된 지방세포에서 지방구 축적 정도와 지방세포 분화와 관련된 단백질의 발현을 조사하였다. 결과에서 보는 것처럼, 지방전구세포인 3T3-L1에서 차가버섯 원물 추출물과 3가지 조건으로 로스팅한 차가버섯 추출물을 가지고 세포독성을 확인한 결과, 로스팅 조건 3번의 차가버섯 추출물을 150, 200 ug/mL을 처리하였을 때 세포생존율이 유의적으로 감소한 것을 제외하면 다른 모든 추출물에서는 유의적인 세포독성은 나타내지 않았다. 또한, Oil Red O 염색법을 통해 지방 축적량을 확인한 결과 차가버섯 원물 및 로스팅 차가버섯 추출물 모두에서 지방구 축적이 대조군에 비해 유의적으로 감소하였으며, 특히 로스팅 조건 2번의 차가버섯 추출물을 200 ug/mL로 처리한 경우에는 억제효과가 더욱 크게 나타났다. 마지막으로 Western blot analysis를 이용하여 지방분화 유도 단백질인 PPAR-γ와 C/EBP-α의 발현량을 확인한 결과, 차가버섯 원물 추출물보다는 조건별로 로스팅한 차가버섯 추출물 모두에서 PPAR-γ와 C/EBP-α의 발현량이 감소하였으며, 특히 100 ug/mL보다 200 ug/mL을 처리하였을 때 발현량이 더욱 감소되었다. 이러한 결과를 통해 차가버섯, 특히 로스팅한 차가버섯이 비만을 예방하는 잠재적 후보군으로서의 가능성 높다는 것을 확인할 수 있었다. The anti-obesity effects of extracts of Inonotus obliquus and roasted I. obliquus were investigated through the measurement of the differentiation of 3T3-L1 pre-adipocytes to adipocytes. Cytotoxic activity was determined by MTT assays on 3T3-L1 pre-adipocyte. Adipocyte differentiation was assessed through the evaluation of lipid accumulation (by using Oil Red O staining) and the expression of adipogenic proteins (by using western blotting). Compared with the control, the treatment of differentiating adipocytes with extracts of I. obliquus , and roasted I. obliquus significantly inhibited differentiation. In the presence of an adipogenic cocktail (isobutyl-methylxanthine, dexamethasone, and insulin), I. obliquus and roasted I. obliquus extracts significantly decreased the expression of adipogenic proteins, peroxisome proliferator-activated receptor-γ (PPARγ), and CCAAT/enhancer binding protein alpha (C/EBP-α), relative to the expression level of N-acetyl-L-cystein (NAC, negative control). These results indicated that the extracts of I. obliquus and roasted I. obliquus were potential candidates for the prevention obesity.