Plasmid presence and antibiotics resistance of Salmonella enteritidis strains

• Main Authors: Ontiveros Corpus, Maria de Lourdes, Vazquez Navarrete, Jesus, Mancera Martinez, Arturo, Garcia V, C, Tenorio Gutierrez, Victor Ruben (INIFAP. CENID-Microbiologia. Km 15.5 Carr Mexico-Toluca. Cuajimalpa, D.F. C.P. 05110. (Mexico))
• Format: Conference Proceeding
• Language: Spanish
• Published: 1996
• Subjects: ANTIMICROBIALS; ANTIMICROBIANOS; ANTIMICROBIEN; CHICKENS; PLASMIDE; PLASMIDIOS; PLASMIDS; POLLO; POULET; RESISTANCE AUX PRODUITS CHIMIQUES; RESISTANCE TO CHEMICALS; RESISTENCIA A PRODUCTOS QUIMICOS; SALMONELLA ENTERITIDIS

El objetivo fue relacionar la resistencia antimicrobiana y la presencia de plasmidos en cepas de origen aviar de S. enteritidis. Se trabajaron 50 cepas de S. enteritidis las cuales se identificaron por pruebas bioquimicas y aglutinacion con sueros especificos. En la prueba de resistencia a los antibioticos se utilizo la tecnica de difusion en placa con discos impregnados, siguiendo la tecnica de Kirby-Bauer para observar la resistencia a los siguientes antimicrobianos: Amikacina 30 micro g, Ampicilina 10 micro g, Carbenicilina 100 micro g, Cefatoxima 30 micro g, Ceftriaxona 30 micro g, Cloranfenicol 130 micro g, Gentamicina 10 micro g, Netilmicina 30 micro g, Nitrofurantoina 300 micro g y Trimetropin-Sulfametaxasol 25 micro g. La concentracion de los cultivos se estandarizo a 150x106 UFC/ml y se sembraron en cajas de agar Muller-Hinton con isopo esteril. Se incubaron a 37C durante 18-20 horas y se midieron las zonas de inhibicion en milimetros con un vernier. Tambien se corrio a cada uno de los antibioticos su concentracion minima inhibitoria a 3 cepas patron de S. enteritidis fagos 1, 3 y 9a., fagotipos que se encuentran con mayor frecuencia en cepas de origen aviar. La extraccion de plasmidos se realizo con el metodo de lisis hipotonica, en la cual se tomo un mililitro de cutivo reciente y a la pastilla se le agrego agua destilada esteril y etanol, con el fin de lisar las bacterias. Posteriormente se hizo una extraccion de proteinas por medio de fenol-cloroformo. Finalmente se hizo la precipitacion de los plasmidos con acetato de potasio y etanol. La visualizacion de los productos extraidos se hizo por medio del corrimiento de estos, en minigeles de agarosa el 0.7%. Se encontro una resistencia en un 100% a Amikacina, Gentamicina, Netilmicina y Nitrofurantoina en cepas que contenian plasmido y en cepas que presentaron hasta 5 plasmidos, por lo que no es posible relacionar la resistencia encontrada en algunas cepas con la presencia de plasmidos en las cepas de S. enteritidis de origen aviar que se trabajaron.