EPITOPES OF THE PROTEIN PRE-M/M OF THE DENGUE VIRUS, SYNTHETIC PEPTIDES

• Main Authors: CHINEA SANTIAGO, GLAY, RODRIGUEZ ROCHE, ROSMARI, PEREZ DIAZ, ANA BEATRIZ, GARAY PEREZ, HILDA ELISA, PUPO ANTUNEZ, MARITZA, GUZMAN TIRADO, GUADALUPE, REYES ACOSTA, OSVALDO, MORIER DIAZ, LUIS, PELEGRINO MARTINEZ DE LA COTERA, JOSE LUIS, GUILLEN NIETO, GERARDO ENRIQUE, PEREZ INSUITA, OMAIDA, VAZQUEZ RAMUDO, SUSANA, PADRON PALOMARES, GABRIEL, PARDO LAZO, ORLANDO LUIS, ALVAREZ VERA, MAYLIN
• Format: Patent
• Language: English; French; Spanish
• Published: 23.07.1998
• Edition: 6
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; HUMAN NECESSITIES; HYGIENE; MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; ORGANIC CHEMISTRY; PEPTIDES; PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS ORMEDICINAL PREPARATIONS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

The present invention relates to five synthetic peptides pertaining to the protein pre-M/M of the dengue-2 virus corresponding to the amino acid sequences 2-31, 45-67, 57-92, 69-93 and 103-124. The immune response to the peptides was evaluated in rats. Recombinant fusion proteins including regions of pre-M/M were constructed. The presence of epitopes for B cells of rats and human beings in the peptides of the protein pre-M/M of the dengue virus was verified. The peptides 3-31 and 103-124 induced neutralizing antibodies against the four serotypes of the dengue virus. The studies of lymphoproliferation with the peptides 57-92 and 3-31 demonstrated crossed recognition of T cells which are peptido-specific to the virus. The rats tested with the dengue-2 virus have demonstrated a protection induced by the peptides 3-31, 57-92 and 69-93. Thus, the presence of sequential epitopes in the protein pre-M/M of the dengue-2 virus and the possible relevance of the same in the immune response against said flavivirus is demonstrated. The present invention relates to five synthetic peptides pertaining to the protein pre-M/M of the dengue-2 virus corresponding to the amino acid sequences 2-31, 45-67, 57-92, 69-93 and 103-124. The immune response to the peptides was evaluated in rats. Recombinant fusion proteins including regions of pre-M/M were constructed. The presence of epitopes for B cells of rats and human beings in the peptides of the protein pre-M/M of the dengue virus was verified. The peptides 3-31 and 103-124 induced neutralizing antibodies against the four serotypes of the dengue virus. The studies of lymphoproliferation with the peptides 57-92 and 3-31 demonstrated crossed recognition of T cells which are peptido-specific to the virus. The rats tested with the dengue-2 virus have demonstrated a protection induced by the peptides 3-31, 57-92 and 69-93. Thus, the presence of sequential epitopes in the protein pre-M/M of the dengue-2 virus and the possible relevance of the same in the immune response against said flavivirus is demonstrated. La presente invención trata de cinco péptidos sintéticos pertenecientes a la proteína pre-M/M del virus Dengue-2 correspondientes a las secuencias aminoacídicas 3-31, 45-67, 57-92, 69-93 y 103-124. La respuesta inmune a los péptidos fue evaluada en ratones. Se construyeron también proteínas de fusión recombinantes que incluyen regiones de pre-M/M. Se comprobó la presencia de epítopes para células B de ratones y de humanos en los péptidos de la proteína pre-M/M del virus Dengue. Los péptidos 3-31 y 103-124 indujeron anticuerpos neutralizantes contra los cuatro serotipos del virus Dengue. Los estudios de linfoproliferación con los péptidos 57-92 y 3-31 mostraron reconocimiento cruzado de células T péptido-específicas al virus. Los ratones retados con el virus Dengue-2 mostraron protección inducida por los péptidos 3-31, 57-92 y 69-93. Así, la presencia de epítopes secuenciales en la proteína pre-M/M del virus Dengue-2 y la posible relevancia de los mismos en la respuesta inmune contra dicho flavivirus queda demostrada. La présente invention a trait à cinq peptides synthétiques appartenant à la protéine pré-M/M du virus de la dengue-2 correspondants aux séquences d'acides aminés 3-31, 45-67, 57-92, 69-93 et 103-124. La réponse immunitaire aux peptides a été évaluée sur des souris. Des protéines de fusion recombinantes comprenant des régions de pré-M/M ont aussi été construites. La présence d'épitopes a été attestée pour les lymphocytes B de souris et d'être humains dans les peptides de la protéine pré-M/M du virus de la dengue. Les peptides 3-31 et 103-124 ont induit des anticorps neutralisants contre les quatre sérotypes du virus de la dengue. Les études de lymphoprolifération portant sur les peptides 57-92 et 3-31 ont fait apparaître une reconnaissance croisée de ces derniers par les lymphocytes T peptido-spécifiques au virus. Les souris qui ont fait l'objet de tests avec le virus de la dengue-2 ont fait montre d'une protection induite par les peptides 3-31, 57-92 et 69-93. Ainsi, la présence d'épitopes séquentiels dans la protéine pré-M/M du virus de la dengue-2 et l'éventuelle pertinence de ceux-ci dans la réponse immunitaire contre ledit flavivirus sont désormais prouvées.