METHOD FOR PURIFYING VIRUS-LIKE PARTICLES

• Main Authors: KOKIDO Yuzuru, AOKI Hirobumi
• Format: Patent
• Language: English; French; Japanese
• Published: 13.02.2020
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; ORGANIC CHEMISTRY; PEPTIDES; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

The present invention is a method for purifying envelope-type virus-like particles, comprising: a step in which a liquid containing envelope-type virus-like particles is passed through a monolithic column having a cation-exchange group immobilized thereon, causing the envelope-type virus-like particles to be adsorbed to the column; and a step in which the envelope-type virus-like particles adsorbed to the column are selectively eluted. The pH of the liquid containing the envelope-type virus-like particles is 10.0 or less, which is higher than the isoelectric point in a region outside the envelope having a protein inserted therein. The present invention makes it possible to purify, in a highly active state, envelope-type virus-like particles which are useful as a material for medicinal drugs etc., such purification being economical on an industrial scale. La présente invention concerne un procédé de purification de particules de type virus de type enveloppe, comprenant : une étape dans laquelle un liquide contenant des particules de type virus de type enveloppe est passé à travers une colonne monolithique sur laquelle est immobilisé un groupe d'échange cationique, amenant les particules de type virus de type enveloppe à être adsorbées sur la colonne ; et une étape dans laquelle les particules de type virus de type enveloppe adsorbées sur la colonne sont éluées de manière sélective. Le pH du liquide contenant les particules de type virus de type enveloppe est de 10,0 ou moins, lequel est supérieur au point isoélectrique dans une région à l'extérieur de l'enveloppe à l'intérieur de laquelle est insérée une protéine. La présente invention permet de purifier, dans un état hautement actif, des particules de type virus de type enveloppe qui sont utiles en tant que matériau pour des médicaments, etc., une telle purification étant économique à l'échelle industrielle. 本発明は、カチオン交換基が固定されたモノリス型カラムに、エンベロープ型ウイルス様粒子を含む液を通液してエンベロープ型ウイルス様粒子を前記カラムに吸着させる工程、および前記カラムに吸着したエンベロープ型ウイルス様粒子を選択的に溶出させる工程を含み、前記のエンベロープ型ウイルス様粒子を含む液のｐＨが、エンベロープに挿入されているタンパク質のエンベロープの外側領域の等電点より高く、ｐＨ１０．０以下である、エンベロープ型ウイルス様粒子の精製方法に関する。本発明によれば、医薬品等の原料として有用なエンベロープ型ウイルス様粒子を、工業的規模で経済的に、かつ高活性状態で精製することができる。