SECUENCIA DE ADNC DERIVADAS DEL GENOMA DEL VIRUS DE LA HEPATITIS C Y SU USO

• Main Authors: ACOSTA RIVERO NELSON, MORALES GRILLO JUAN, FALCON CAMA VIVIANA, BARRO ALVAREZ MARIO LIVAN, DUENAS CARRERA SANTIAGO, VINA RODRIGUEZ ARIEL, GARCIA CABRERA ODALYS, GARCIA MARTINEZ CIRO, GUERRA AIZPURUA IVIS
• Format: Patent
• Language: Spanish
• Published: 22.12.2000
• Edition: 7
• Subjects: BEER; BIOCHEMISTRY; CHEMISTRY; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL ORENZYMOLOGICAL PROCESSES; ENZYMOLOGY; HUMAN NECESSITIES; HYGIENE; MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEICACIDS OR MICROORGANISMS; MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; ORGANIC CHEMISTRY; PEPTIDES; PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; SPIRITS; VINEGAR; WINE

La presente invención provee una serie de secuencias de ADNc derivadas del virus de la hepatitis C, denominado VHC-Cu, y la expresión de los antígenos codificados por dichas secuencias. El ARN viral del VHC-Cu se extrajo del suero de un paciente con hepatitis no-A, no-B. El ADNc se amplificó por PCR y los fragmentos obtenidos fueron clonados y secuenciados. Los fragmentos que codificaban para polipéptidos antigénicos fueron expresados en levadura, obteniéndose una proteína multimérica o una partícula semejante a virus. El análisis por microscopía electrónica mostró una partícula de 20 a 60 nm de diámetro, con densidad de flotación entre 1.16 y 1.30 g/cm3 en gradientes de sacarosa y cloruro de cesio. Esta invención puede ser utilizada en la medicina para el desarrollo de vacunas terapéuticas y profilácticas, para la producción de proteínas con interés diagnóstico, para el desarrollo de anticuerpos policlonales, anticuerpos monoclonales naturales o recombinantes, y agentes antivirales. The present invention relates to a series of cDNA sequences derived from the hepatitis C virus, called CHV-Cu, and the expression of the antigenes coded by said sequences. The viral RNA of the CHV-Cu was extracted from the serum of a patient with non-A, non-B hepatitis. The cDNA was amplified by PCR and the fragments obtained were cloned and sequenced. The fragments which coded for antigenic polypeptides were expressed in yeast, thereby obtaining a multimer protein or a virus-like particle. The analysis by electronic microscopy showed a particle having a diameter comprised between 20 and 60 nm with a flotation density between 1.16 and 1.30 g/cm in gradients of saccharose and cesium chloride. The invention may be applied to the medical field for the development of therapeutical and prophylactic vaccines, for the production of proteins having a diagnostic interest, for the development of polyclonal antibodies, natural or recombinant monoclonal antibodies and anti-viral agents.