EVIDÊNCIAS DE ESTRESSE E HEMATOPOIESE INEFICAZ INDUZIDOS POR HIDROXIUREIA EM PACIENTES COM ANEMIA FALCIFORME

• Published in: Hematology, Transfusion and Cell Therapy Vol. 45; p. S76
• Main Authors: Y Teixeira, J Milhomens, C Bonaldo, P Palma, DT Covas, S Kashima
• Format: Journal Article
• Language: English
• Published: Elsevier 01.10.2023
• ISSN: 2531-1379

A hidroxiureia (HU) é um medicamento que aumenta os níveis de hemoglobina fetal nos eritrócitos, diminuindo complicações clínicas como vasoclusão, hemólise e inflamação sistêmica associadas à anemia falciforme (AF). Contudo, a HU interfere em aspectos essenciais do nicho hematopoiético, como a proliferação, a renovação e a diferenciação das células-tronco e progenitoras hematopoéticas (CTPHs). Isso limita as perspectivas de sucesso em procedimentos como o transplante de células-tronco e a terapia gênica, que são as únicas abordagens terapêuticas curativas. Considerando a falta de estudos na caracterização detalhada das CTPHs na AF, este estudo avaliou a integridade imunofenotípica das populações de CTPHs circulantes em pacientes com AF, tratados (HU, n = 10) ou não (CT, n = 7) com HU. Para tanto, as células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de pacientes e doadores saudáveis (HD, n = 5) foram isoladas por gradiente de densidade e avaliadas por citometria de fluxo, utilizando um painel de anticorpos específico para CTPHs, além das moléculas CD49d e CD235a. A análise estatística foi conduzida por meio do teste de Kruskal-Wallis e do teste de comparações múltiplas de Dunn (p < 0.05). A contagem total de células viáveis CD34 é maior nos grupos com AF, sendo que o grupo HU apresentou a maior mediana. Os níveis de células CD34CD49d são maiores entre os pacientes dos grupos CT e HU. No que diz respeito ao compartimento de progenitores hematopoiéticos multipotentes (HMC), também foram observadas diferenças significativas na contagem total entre pacientes tratados com HU e controles (p < 0.01). As HMCs positivas para CD49d são mais frequentes no grupo CT, enquanto CD235a é mais presente no grupo HU. Ao analisar especificamente as células-tronco hematopoiéticas (HSC), observou-se que, diferentemente dos pacientes, os indivíduos controle não apresentam essas populações no sangue periférico, indicando que a presença dessas células na circulação é uma característica inerente à AF. Além disso, a mediana da quantidade de células HSCs positivas para CD49d e CD235a também é maior nos grupos CT e HU do que no grupo HD. Tendo em vista que o CD49d é um marcador de adesão e cinética hematopoiética, sua presença em maior quantidade nas células-tronco indica uma hematopoiese possivelmente ineficaz. Já a presença do CD235a junto ao marcador CD34 está relacionada com uma diferenciação celular acelerada. Esses achados evidenciam uma heterogeneidade imunofenotípica nas CTPHs nos indivíduos com AF e, principalmente, uma contribuição da HU para essas alterações. Além disso, mostram que parte das células envolvidas na hematopoiese desses indivíduos pode estar comprometida e, portanto, inadequada para terapias que envolvam edição gênica. Nas próximas etapas, ensaios para avaliação da capacidade de proliferação e diferenciação in vitro dessas populações e grupos de pacientes deverão ser executados para testar a funcionalidade das células sob a influência da HU. Financiamento: FUNDHERP, CTC/FAPESP (2013/08135-2), FAPESP (2022/09643-0), INCTC/CNPq (465539/2014-9).