间接竞争ELISA检测蜂蜜中氧氟沙星残留

TS207.3; 为了建立间接竞争ELISA法检测氧氟沙星(Ofloxacin,OFLX)在蜂蜜中的残留,本研究采用活性酯法将OFLX与载体蛋白偶联,得到抗OFLX完全抗原(OFLX-BSA)和检测抗原(OFLX-OVA).采用OFLX-BSA免疫BALB/c小鼠,之后用杂交瘤等技术制备抗OFLX单克隆抗体.通过优化反应条件,建立间接竞争ELISA方法,并对该法的准确度、精密度和特异性进行判定.结果显示OFLX与载体蛋白偶联成功;得到一株抗OFLX的杂交瘤细胞株(3D7),单克隆抗体的IC50值为1.17ng/mL;该法在蜂蜜中的OFLX平均添加回收率为84.1％,其批间变异系数均大于批内的变...

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Published in食品工业科技 Vol. 45; no. 23; pp. 240 - 247
Main Authors 杨兴东, 魏慧雅, 曲扬
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 周口师范学院食品药品检验检测中心,生命科学与农学学院,河南周口 466001%河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳 471000 01.12.2024
Subjects
ofloxacin
immunogen
氧氟沙星
酶联免疫吸附试验(ELISA)
honey
蜂蜜
enzyme linked immunosorbent assay(ELISA)
monoclonal antibody
免疫原
单克隆抗体
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ISSN1002-0306
DOI10.13386/j.issn1002-0306.2023120006

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Summary:TS207.3; 为了建立间接竞争ELISA法检测氧氟沙星(Ofloxacin,OFLX)在蜂蜜中的残留,本研究采用活性酯法将OFLX与载体蛋白偶联,得到抗OFLX完全抗原(OFLX-BSA)和检测抗原(OFLX-OVA).采用OFLX-BSA免疫BALB/c小鼠,之后用杂交瘤等技术制备抗OFLX单克隆抗体.通过优化反应条件,建立间接竞争ELISA方法,并对该法的准确度、精密度和特异性进行判定.结果显示OFLX与载体蛋白偶联成功;得到一株抗OFLX的杂交瘤细胞株(3D7),单克隆抗体的IC50值为1.17ng/mL;该法在蜂蜜中的OFLX平均添加回收率为84.1％,其批间变异系数均大于批内的变异系数,与马波沙星的交叉反应率为52.9％,与其他竞争反应物没有交叉反应.本研究建立的间接竞争ELISA方法能够满足OFLX在蜂蜜中残留的测定需求.
ISSN:1002-0306
DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2023120006