c-Met抑制剂AMG-102增强喉鳞癌细胞放射敏感性的机制

• Published in: 中华肿瘤杂志 Vol. 41; no. 12; pp. 909 - 917
• Main Authors: 曹峰, 吕欣, 董凯峰, 范才, 张建军, 陈坤, 马博敬, 侯春立, 张翠红
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 河北医科大学第四医院放疗科,石家庄,050011%邢台市柏乡县中心医院医务科055450%河北医科大学第一医院耳鼻喉科,石家庄,050031%解放军联勤保障部队第九八〇医院放疗科,石家庄,050082%解放军联勤保障部队第九八〇医院耳鼻喉头颈外科,石家庄,050082%解放军联勤保障部队第九八〇医院肿瘤科,石家庄,050082 01.12.2019
• Subjects: c?Met; Cell proliferation; 喉鳞状细胞癌; 增殖; Radiosensitivity; Laryngeal squamous cell carcinoma; 凋亡; 放射增敏; AMG?102; Apoptosis
• ISSN: 0253-3766
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3766.2019.12.006

目的 探讨c?Met抑制剂AMG?102对喉鳞癌细胞的增殖抑制和放射增敏作用.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测AMG?102对喉鳞癌细胞株Hep?2和KBV200的增殖抑制作用.采用克隆形成实验分析AMG?102对Hep?2和KBV200细胞的放射增敏作用.采用流式细胞术检测Hep?2和KBV200细胞的凋亡情况.采用Western blot法检测细胞中c?Met／p?Met、凋亡蛋白cleaved caspase 3及下游信号通路蛋白Akt／p?Akt和Erk／p?Erk的表达.利用RNA干扰技术下调细胞中c?Met表达,转染c?Met过表达质粒使细胞中c?Met过表达,分析Hep?2和KBV200细胞对AMG?102的敏感性变化.结果 与KBV200细胞比较,Hep?2细胞对AMG?102更加敏感,半数抑制浓度(IC50)分别为14和9 μmol／L. Hep?2细胞中c?Met和p?Met蛋白的相对表达量分别为194.48±0.57和177.76±1.53,均明显高于KBV200细胞(分别为171.24±1.00和115.37±0.56,均P＜0.001). AMG?102作用于肝细胞生长因子(HGF)处理后的KBV200细胞,可使其p?Met蛋白的相对表达水平明显降低(P＜0.001).与二甲基亚砜(DMSO)组比较,AMG?102联合照射可明显增加Hep?2细胞的放射敏感性( SER＝1.28,P＜0.001);而AMG?102对KBV200细胞的放射敏感性影响很小(SER＝1.18,P＝0.002).与4 Gy照射组和5 μmol／L AMG?102处理组比较,4 Gy照射+5 μmol／L AMG?102处理组Hep?2细胞的凋亡率明显增加,cleaved caspase?3蛋白的表达水平明显升高.而各处理组 KBV200 细胞的凋亡率和 cleaved caspase?3蛋白的表达水平无明显变化.与DMSO处理组比较,4 Gy照射组、5 μmol／L AMG?102处理组和4 Gy照射+5 μmol／L AMG?102处理组Hep?2细胞中p?Met、p?Akt和p?Erk蛋白的表达水平下降,其中4 Gy照射+5 μmol／L AMG?102处理组中p?Met、p?Akt和p?Erk蛋白的表达水平比4 Gy照射组和5 μmol／L AMG?102处理组更低.但在KBV200细胞中,各处理组