Chlamydia trachomatis感染細胞抽出液に見出されたC.trachomatis感染患者血清と反応する抗原の解析
Chlamydia trachomatis感染症の血清診断のための新しいマーカーを見出すため, C. trachomatis感染HeLa229細胞の抽出液を抗原として, Western blot (WB) 法を行った. 血清は継続して得られた2症例の患者血清 (肺炎, 子宮頸管炎, 各4検体) を用いた. そして治療後の週数や抗体レベルに応じて消退するバンドを検索した. その結果, 観察期間内に完全には消失しなかったが, 次第に薄くなる17KDaバンドを検出した. このバンドは子宮頸管炎患者 (外来受診時にClearview法またはIDEIA-PCEクラミジア (IDEIA) 法が陽性) にお...
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Published in | 感染症学雑誌 Vol. 77; no. 10; pp. 830 - 838 |
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Main Authors | , , , , , , |
Format | Journal Article |
Language | Japanese |
Published |
一般社団法人 日本感染症学会
20.10.2003
|
Online Access | Get full text |
ISSN | 0387-5911 1884-569X |
DOI | 10.11150/kansenshogakuzasshi1970.77.830 |
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Abstract | Chlamydia trachomatis感染症の血清診断のための新しいマーカーを見出すため, C. trachomatis感染HeLa229細胞の抽出液を抗原として, Western blot (WB) 法を行った. 血清は継続して得られた2症例の患者血清 (肺炎, 子宮頸管炎, 各4検体) を用いた. そして治療後の週数や抗体レベルに応じて消退するバンドを検索した. その結果, 観察期間内に完全には消失しなかったが, 次第に薄くなる17KDaバンドを検出した. このバンドは子宮頸管炎患者 (外来受診時にClearview法またはIDEIA-PCEクラミジア (IDEIA) 法が陽性) において検出された. すなわち, IDEIA法が陽性の25例中20例 (80%), Clearview法が陽性の33例中18例 (54.5%), 両方が陽性の16例中12例 (75%) であった. しかし, 対照の各陽性血清では検出されなかった. また, 17KDa抗原に対する抗体検出の頻度はmicro-immunofluorescence test (MIF) やペプタイドクラミジア法で得た抗C. trachomatis抗体の検出頻度とほとんど同じであった. これらの成績は17KDaバンドが, WB法による抗体検出のマーカーとして利用できる可能性を示す. この抗原は飽和度60%の硫安で沈殿し, タンパク分解酵素により消化された. またアミノ酸解析の結果, ヒト由来の酵素nucleoside diphosphate kinase Bであることが明らかになった. |
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AbstractList | Chlamydia trachomatis感染症の血清診断のための新しいマーカーを見出すため, C. trachomatis感染HeLa229細胞の抽出液を抗原として, Western blot (WB) 法を行った. 血清は継続して得られた2症例の患者血清 (肺炎, 子宮頸管炎, 各4検体) を用いた. そして治療後の週数や抗体レベルに応じて消退するバンドを検索した. その結果, 観察期間内に完全には消失しなかったが, 次第に薄くなる17KDaバンドを検出した. このバンドは子宮頸管炎患者 (外来受診時にClearview法またはIDEIA-PCEクラミジア (IDEIA) 法が陽性) において検出された. すなわち, IDEIA法が陽性の25例中20例 (80%), Clearview法が陽性の33例中18例 (54.5%), 両方が陽性の16例中12例 (75%) であった. しかし, 対照の各陽性血清では検出されなかった. また, 17KDa抗原に対する抗体検出の頻度はmicro-immunofluorescence test (MIF) やペプタイドクラミジア法で得た抗C. trachomatis抗体の検出頻度とほとんど同じであった. これらの成績は17KDaバンドが, WB法による抗体検出のマーカーとして利用できる可能性を示す. この抗原は飽和度60%の硫安で沈殿し, タンパク分解酵素により消化された. またアミノ酸解析の結果, ヒト由来の酵素nucleoside diphosphate kinase Bであることが明らかになった. |
Author | 岩田, 敏 佐藤, 吉壮 菰田, 照子 秋田, 博伸 佐藤, 梢 坂内, 久一 砂川, 慶介 |
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References | 21) Iliffe-Lee ER, McClarty G: Glucose metabolism in Chlamydia trachomatis: the 'energy parasite' hypothesis revisited. Mol Microbiol 1999; 33: 177-87. 11) Yong EC, Chinn JS, Caldwell HD, Kuo CC: Reticulate bodies as single antigen in Chlamydia trachomatis serology with microimmunofluorescence. J Clin Microbiol 1979; 10: 351-6. 2) McGregor JA: Chlamydial infection in women. Obstet Gynecol Clin North Am 1989; 16: 565-92. 15) 岡田吉美: 基礎実験講座, 基本操作2. 代謝1964; 1: 142-7. 13) Laemmli UK: Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature 1970; 227: 680-5. 20) Stephens RS, Kalman S, Lammel CJ, Fan J, Marathe R, Aravind L, et al.: Genome sequence of an obligate intracellular pathogen of humans: Chlamydia trachomatis. Science 1998; 282 (5389): 754-9. 3) 体外診断用医薬品集.(社) 日本臨床検査薬協会編 1997年度版 (追補), 薬事日報社. 17) Young H: Syphilis Serology. Dermatol Clin 1998; 16: 691-8. 9) Rank RG: Models of Immunity. In: Stephens RS, ed. Chlamydia intracellular biology, pathogenesis, and immunity. ASM, Massachusetts, 1999; p.239-95. 4) Wang SP, Grayston JT: Immunologic relationship between genital TRIC, lymphogranuloma venereum, and related organisms in a new microtiter indirect immunofluorescence test. Am J Ophthalmol 1970; 70: 367-74. 16) Rockey DD, Rosquist JL: Infect and immun, Protein antigens of Chlamydia psittaci present in Infected cells but not detected in the infectious elementary body. Infect Immun 1994; 62: 106-12. 6) Newhall WJ, Batteiger B, Jones RB: Analysis of the human serological response to proteins of Chlamydia trachomatis. Infect Immun 1982; 38: 1181-9. 7) Gonen R, Shemer-Avni Y, Csango PA, Sarov B, Friedman MG: Serum reactivity to Chlamydia trachomatis and C. pneumoniae antigens in patients with documented infection and in healthy children by micro-immunofluorescence and immunoblotting techniques. APMIS 1993; 101: 719-26. 22) Weigent DA, Jenkin HM: Contrast of glycogenesis and protein synthesis in monkey kidney cells and HeLa cells infected with Chlamydia trachomatis lymphogranuloma venereum. Infect Immun 1978; 203: 632-9. 5) 坂内久一, 菰田照子, 秋田博伸, 岩田敏, 佐藤吉壮, 砂川慶介: 合成ペプチド抗原を用いた抗Chlamydia trachomatis抗体の検出. 感染症誌 1999; 73: 633-9. 18) Bannai H, Komoda T, Tezuka T: A new antigen for immunoblotting method in serodiagnosis of Chlamydia infection. 23rd World Congress of Medical Technology, Programme & Abstract book, Singapore, June 29, 1998: 71. 19) 菰田照子, 手塚敏春, 宮沢博, 坂内久一: Chlamydia trachomatis感染細胞抽出液中に見いだされ た抗原タンパクの同定. 感染症誌 2000; 74: 903. 1) Taler RD, Thomas BJ: The role of Chlamydia trachomatis in genital tract and associated diseases. J Clin Pathol 1980; 33: 205-33. 8) Nurminen M, Leinonen M, Saikku P, Makela PH: The genus-specific antige of Chlamydia; resemblance to the lipopoly-saccharide of enteric bacteria. Science 1983; 220 (4603): 1279-81. 12) 手塚敏春, 坂内久一, 菰田照子, 宮沢博, 芦原義守: クラミジア感染細胞の抽出抗原によるヒトクラミジア抗体検出. 感染症誌 1993; 67: 960-1. 14) 芝紀代子: 目で見る電気泳動法3ポリアクリルアミドゲル. 医歯薬出版株式会社, 東京, 1991. 10) Caldwell HD, Kromhout J, Schachter: Purification and partial characterization of the major outer membrane protein of Chlamydia trachomatis. J Infect and Immun 1981; 31: 1161-76. |
References_xml | – reference: 15) 岡田吉美: 基礎実験講座, 基本操作2. 代謝1964; 1: 142-7. – reference: 16) Rockey DD, Rosquist JL: Infect and immun, Protein antigens of Chlamydia psittaci present in Infected cells but not detected in the infectious elementary body. Infect Immun 1994; 62: 106-12. – reference: 19) 菰田照子, 手塚敏春, 宮沢博, 坂内久一: Chlamydia trachomatis感染細胞抽出液中に見いだされ た抗原タンパクの同定. 感染症誌 2000; 74: 903. – reference: 3) 体外診断用医薬品集.(社) 日本臨床検査薬協会編 1997年度版 (追補), 薬事日報社. – reference: 10) Caldwell HD, Kromhout J, Schachter: Purification and partial characterization of the major outer membrane protein of Chlamydia trachomatis. J Infect and Immun 1981; 31: 1161-76. – reference: 17) Young H: Syphilis Serology. Dermatol Clin 1998; 16: 691-8. – reference: 20) Stephens RS, Kalman S, Lammel CJ, Fan J, Marathe R, Aravind L, et al.: Genome sequence of an obligate intracellular pathogen of humans: Chlamydia trachomatis. Science 1998; 282 (5389): 754-9. – reference: 6) Newhall WJ, Batteiger B, Jones RB: Analysis of the human serological response to proteins of Chlamydia trachomatis. Infect Immun 1982; 38: 1181-9. – reference: 22) Weigent DA, Jenkin HM: Contrast of glycogenesis and protein synthesis in monkey kidney cells and HeLa cells infected with Chlamydia trachomatis lymphogranuloma venereum. Infect Immun 1978; 203: 632-9. – reference: 1) Taler RD, Thomas BJ: The role of Chlamydia trachomatis in genital tract and associated diseases. J Clin Pathol 1980; 33: 205-33. – reference: 7) Gonen R, Shemer-Avni Y, Csango PA, Sarov B, Friedman MG: Serum reactivity to Chlamydia trachomatis and C. pneumoniae antigens in patients with documented infection and in healthy children by micro-immunofluorescence and immunoblotting techniques. APMIS 1993; 101: 719-26. – reference: 14) 芝紀代子: 目で見る電気泳動法3ポリアクリルアミドゲル. 医歯薬出版株式会社, 東京, 1991. – reference: 8) Nurminen M, Leinonen M, Saikku P, Makela PH: The genus-specific antige of Chlamydia; resemblance to the lipopoly-saccharide of enteric bacteria. Science 1983; 220 (4603): 1279-81. – reference: 5) 坂内久一, 菰田照子, 秋田博伸, 岩田敏, 佐藤吉壮, 砂川慶介: 合成ペプチド抗原を用いた抗Chlamydia trachomatis抗体の検出. 感染症誌 1999; 73: 633-9. – reference: 12) 手塚敏春, 坂内久一, 菰田照子, 宮沢博, 芦原義守: クラミジア感染細胞の抽出抗原によるヒトクラミジア抗体検出. 感染症誌 1993; 67: 960-1. – reference: 9) Rank RG: Models of Immunity. In: Stephens RS, ed. Chlamydia intracellular biology, pathogenesis, and immunity. ASM, Massachusetts, 1999; p.239-95. – reference: 18) Bannai H, Komoda T, Tezuka T: A new antigen for immunoblotting method in serodiagnosis of Chlamydia infection. 23rd World Congress of Medical Technology, Programme & Abstract book, Singapore, June 29, 1998: 71. – reference: 2) McGregor JA: Chlamydial infection in women. Obstet Gynecol Clin North Am 1989; 16: 565-92. – reference: 11) Yong EC, Chinn JS, Caldwell HD, Kuo CC: Reticulate bodies as single antigen in Chlamydia trachomatis serology with microimmunofluorescence. J Clin Microbiol 1979; 10: 351-6. – reference: 13) Laemmli UK: Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature 1970; 227: 680-5. – reference: 21) Iliffe-Lee ER, McClarty G: Glucose metabolism in Chlamydia trachomatis: the 'energy parasite' hypothesis revisited. Mol Microbiol 1999; 33: 177-87. – reference: 4) Wang SP, Grayston JT: Immunologic relationship between genital TRIC, lymphogranuloma venereum, and related organisms in a new microtiter indirect immunofluorescence test. Am J Ophthalmol 1970; 70: 367-74. |
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