砂ネズミ脳微小血管内皮細胞の継代培養 培養細胞の膜酵素の染色性に関する検討
砂ネズミの脳微小血管内皮細胞の継代培養を行ない, 培養細胞の生物学的特性の一部を検索した.Bowmanらの方法を一部改変し砂ネズミの全脳から微小血管をとりだし培養に移し, 細胞が単層敷石状に配列した一つのコロニーのみを選択し, 継代培養を行なった.継代は多くの場合20代程度は可能で, 酵素抗体法による第VIII因子の染色では全ての細胞が陽性であった.また, 一部の細胞ではtube様構造を形成した.alkaline phosphatase (Al-P) とγ-glutamyltranspeptidase (γ-GTP) を組織化学的手法を用いて染色すると, Al-Pは初代培養ではほとんど全ての細...
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Published in | 脳卒中 Vol. 11; no. 1; pp. 89 - 95 |
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Main Authors | , , , , |
Format | Journal Article |
Language | Japanese |
Published |
一般社団法人 日本脳卒中学会
25.02.1989
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Online Access | Get full text |
ISSN | 0912-0726 1883-1923 |
DOI | 10.3995/jstroke.11.89 |
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Abstract | 砂ネズミの脳微小血管内皮細胞の継代培養を行ない, 培養細胞の生物学的特性の一部を検索した.Bowmanらの方法を一部改変し砂ネズミの全脳から微小血管をとりだし培養に移し, 細胞が単層敷石状に配列した一つのコロニーのみを選択し, 継代培養を行なった.継代は多くの場合20代程度は可能で, 酵素抗体法による第VIII因子の染色では全ての細胞が陽性であった.また, 一部の細胞ではtube様構造を形成した.alkaline phosphatase (Al-P) とγ-glutamyltranspeptidase (γ-GTP) を組織化学的手法を用いて染色すると, Al-Pは初代培養ではほとんど全ての細胞で陽性であったが, 5代以後ではほとんど陰性になった.γ-GTPは, 初代培養で形成されたコロニーの中心の一部の細胞のみ陽性で, 二代以後では陰性であった.脳微小血管内皮細胞を培養に移した時, その特異な性格の一部は失われる可能性のあることが示唆された. |
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AbstractList | 砂ネズミの脳微小血管内皮細胞の継代培養を行ない, 培養細胞の生物学的特性の一部を検索した.Bowmanらの方法を一部改変し砂ネズミの全脳から微小血管をとりだし培養に移し, 細胞が単層敷石状に配列した一つのコロニーのみを選択し, 継代培養を行なった.継代は多くの場合20代程度は可能で, 酵素抗体法による第VIII因子の染色では全ての細胞が陽性であった.また, 一部の細胞ではtube様構造を形成した.alkaline phosphatase (Al-P) とγ-glutamyltranspeptidase (γ-GTP) を組織化学的手法を用いて染色すると, Al-Pは初代培養ではほとんど全ての細胞で陽性であったが, 5代以後ではほとんど陰性になった.γ-GTPは, 初代培養で形成されたコロニーの中心の一部の細胞のみ陽性で, 二代以後では陰性であった.脳微小血管内皮細胞を培養に移した時, その特異な性格の一部は失われる可能性のあることが示唆された. |
Author | 田中, 隆一 小池, 哲雄 石井, 鐐二 皆河, 崇志 佐々木, 修 |
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Publisher | 一般社団法人 日本脳卒中学会 |
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References | 9) Jaffe EA, Nachman RL, Becker CG, et al : Culture of human endothelial cells derived from umbilical veins. Identification by morphological and immunologic criteria. J Clin Invest 52 : 2745-756, 1973 11) ) 野原正敏 : 牛脳底動脈内皮細胞及び冠状動脈内皮細胞の継代培養とその形態及び生物学的性状について。久留米医会誌43 : 1029-1056, 1980 17) 佐々木修, 田中隆一, 小池哲雄ら : 脳梗塞巣修過程に発生する新生血管のenzymaticbarrierに関する研究.脳神経40 : 1037-1043, 1983 10) Maruyama Y : The human endothelial cell in tissue culture. Z Zellforsch 60 : 69-79, 1963. 13) Panula P, Joo F, Rechardt L : Evidence for the presence of viable endothelial cells in cultures derived from dissociated rat brain. Experientia 34 : 95-97, 1978 7) Folkman J, Haundenschild C : Angiogenes is in vitro. Nature 288 : 551-556, 1980 14) Phillips P, Kumar P, Kumar S, et al : Isolation and characterization of endothelial cells from rat and cow brain white matter. J Anat 129 : 261-272, 1979 12) Orlowski M, Sessa G, Green JP : γ-glutamyl transpeptidase in brain capillaries : Possible site of a blood-brain barrier for amino acids. Science 184 : 66-68, 1974 19) Spatz M, Bembry J, Dogson RF, et al : Endothelial cell cultures derived from isolated cerebral microvessels. Brain Res 191 : 577-582, 1980. 15) Rutenberg AM, Kim H, Fishbein JW, Hanbeer JS, Wasserkrug HL, Seligman AM : Histo-chemical and ultrastructural demonstration of γ-glutamyl transpeptidase activity. J Histo-chem Cytochem 17 : 517-526, 1969 5) Debault LE, Cancilla PA : γ-glutamyl transpeptidase in isolated brain endothelial cells : Induction by glial cells in vitro. Science 207 : 653-655, 1979 21) Vorbrodt AW, Losinsky AS, Wisniewski HM : Enzyme cytochemistry of blood-brain barrier (BBB) disturbances. Acta Neuropath (Berl) Supp VIII : 43-57, 1983 1) Bowman PD, Betz AL, Goldstein GW : Primary culture of microvascular endothelial cells from bovine retina. In Vitro 18 : 626-632, 1982 20) Sternberger LA : Immunocytochemistry 2nd ed, John Willey (New York) 1977 22) Wagner RC, Matthews MA : The isolation and culture of capillary endothelial cells from epididymal fat pad. Microvascular Res 10 : 286-297, 1975 4) Davison PM, Bensch K, Karasek MA : Isolation and growth of endothelial cells from the microvessels of the newborn human fore skin in cell culture. J Invest Dermatol 75 : 316-321, 1980 23) 山崎一徳 : ヒト神経膠原腫細胞細胞株の樹立とLasat及びnudeマウスへの移植-膠腫細胞の分化度および異形性との関連について-.神経病理学3 : 29-38, 1982 8) Folkman J, Haudenschild CC, Zetter BR : Long-term culture of capillary endothelial cells. Proc Natl Acad Sci USA 76 : 5217-5221, 1979 18) Schwartz SM : Selection and characterization of bovine aortic endothelial cells. In Vitro 14 : 966-980, 1978 6) Debault LE, Henriquez E, Hart MN, et al : Cerebral microvessels and derived cells in tissue culture : II. Establishment, identification, and preliminary characterization of an endothelial cell line. In Vitro 17 : 480-494, 1981 16) 代々木修, 田中隆一, 小池哲雄ら : 脳虚血と血管内皮細胞障害一第vm因子関察抗原を指標とした免疫組織化学的研究一.脳神経40 : 469-476, 1988 3) Burtstone MS : Enzyme histochemistry. Academic Press (New York) 1962 2) Bowman PD, Ennis SR, Rarey KE, et al : Brain microvessels endothelial cells in tissue culture : A model for study of blood-brain barrier permeability. Ann Neurol 14 : 396-402, 1983 |
References_xml | – reference: 23) 山崎一徳 : ヒト神経膠原腫細胞細胞株の樹立とLasat及びnudeマウスへの移植-膠腫細胞の分化度および異形性との関連について-.神経病理学3 : 29-38, 1982 – reference: 1) Bowman PD, Betz AL, Goldstein GW : Primary culture of microvascular endothelial cells from bovine retina. In Vitro 18 : 626-632, 1982 – reference: 13) Panula P, Joo F, Rechardt L : Evidence for the presence of viable endothelial cells in cultures derived from dissociated rat brain. Experientia 34 : 95-97, 1978 – reference: 5) Debault LE, Cancilla PA : γ-glutamyl transpeptidase in isolated brain endothelial cells : Induction by glial cells in vitro. Science 207 : 653-655, 1979 – reference: 16) 代々木修, 田中隆一, 小池哲雄ら : 脳虚血と血管内皮細胞障害一第vm因子関察抗原を指標とした免疫組織化学的研究一.脳神経40 : 469-476, 1988 – reference: 6) Debault LE, Henriquez E, Hart MN, et al : Cerebral microvessels and derived cells in tissue culture : II. Establishment, identification, and preliminary characterization of an endothelial cell line. In Vitro 17 : 480-494, 1981 – reference: 11) ) 野原正敏 : 牛脳底動脈内皮細胞及び冠状動脈内皮細胞の継代培養とその形態及び生物学的性状について。久留米医会誌43 : 1029-1056, 1980 – reference: 8) Folkman J, Haudenschild CC, Zetter BR : Long-term culture of capillary endothelial cells. Proc Natl Acad Sci USA 76 : 5217-5221, 1979 – reference: 17) 佐々木修, 田中隆一, 小池哲雄ら : 脳梗塞巣修過程に発生する新生血管のenzymaticbarrierに関する研究.脳神経40 : 1037-1043, 1983 – reference: 7) Folkman J, Haundenschild C : Angiogenes is in vitro. Nature 288 : 551-556, 1980 – reference: 12) Orlowski M, Sessa G, Green JP : γ-glutamyl transpeptidase in brain capillaries : Possible site of a blood-brain barrier for amino acids. Science 184 : 66-68, 1974 – reference: 10) Maruyama Y : The human endothelial cell in tissue culture. Z Zellforsch 60 : 69-79, 1963. – reference: 15) Rutenberg AM, Kim H, Fishbein JW, Hanbeer JS, Wasserkrug HL, Seligman AM : Histo-chemical and ultrastructural demonstration of γ-glutamyl transpeptidase activity. J Histo-chem Cytochem 17 : 517-526, 1969 – reference: 18) Schwartz SM : Selection and characterization of bovine aortic endothelial cells. In Vitro 14 : 966-980, 1978 – reference: 9) Jaffe EA, Nachman RL, Becker CG, et al : Culture of human endothelial cells derived from umbilical veins. Identification by morphological and immunologic criteria. J Clin Invest 52 : 2745-756, 1973 – reference: 14) Phillips P, Kumar P, Kumar S, et al : Isolation and characterization of endothelial cells from rat and cow brain white matter. J Anat 129 : 261-272, 1979 – reference: 19) Spatz M, Bembry J, Dogson RF, et al : Endothelial cell cultures derived from isolated cerebral microvessels. Brain Res 191 : 577-582, 1980. – reference: 21) Vorbrodt AW, Losinsky AS, Wisniewski HM : Enzyme cytochemistry of blood-brain barrier (BBB) disturbances. Acta Neuropath (Berl) Supp VIII : 43-57, 1983 – reference: 2) Bowman PD, Ennis SR, Rarey KE, et al : Brain microvessels endothelial cells in tissue culture : A model for study of blood-brain barrier permeability. Ann Neurol 14 : 396-402, 1983 – reference: 4) Davison PM, Bensch K, Karasek MA : Isolation and growth of endothelial cells from the microvessels of the newborn human fore skin in cell culture. J Invest Dermatol 75 : 316-321, 1980 – reference: 22) Wagner RC, Matthews MA : The isolation and culture of capillary endothelial cells from epididymal fat pad. Microvascular Res 10 : 286-297, 1975 – reference: 3) Burtstone MS : Enzyme histochemistry. Academic Press (New York) 1962 – reference: 20) Sternberger LA : Immunocytochemistry 2nd ed, John Willey (New York) 1977 |
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Subtitle | 培養細胞の膜酵素の染色性に関する検討 |
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