マウス初期胚糖輸送担体 (GLUTl) mRNA発現のRT-PCR法による解析
マウス初期胚は発育分化にともない, 糖取り込み能, 糖利用能が急速に増加し, 糖輸送担体 (GLUT1) 蛋白の発現増加が, その要因であることが明らかになってきている。今回, RT-PCR (reverse transcription-polymerase chain reaction) 法を用いることにより, 初期胚におけるGLUTl mRNAの解析を行った。マウス2細胞期胚, 胞胚のそれぞれ100個より, ミクロスピソカラムを用いてpolyA+RNAを抽出し, 逆転写して一本鎖cDNAを合成した。このcDNAを鋳型として, マウスGLUTi cDNAの361bpを規定するプライマーを用い...
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Published in | 哺乳動物卵子学会誌 Vol. 11; no. 1; pp. 1 - 7 |
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Main Authors | , , , , |
Format | Journal Article |
Language | Japanese |
Published |
日本哺乳動物卵子学会
01.04.1994
|
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ISSN | 0916-7625 1884-6513 |
DOI | 10.14893/jmor1991.11.1 |
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Abstract | マウス初期胚は発育分化にともない, 糖取り込み能, 糖利用能が急速に増加し, 糖輸送担体 (GLUT1) 蛋白の発現増加が, その要因であることが明らかになってきている。今回, RT-PCR (reverse transcription-polymerase chain reaction) 法を用いることにより, 初期胚におけるGLUTl mRNAの解析を行った。マウス2細胞期胚, 胞胚のそれぞれ100個より, ミクロスピソカラムを用いてpolyA+RNAを抽出し, 逆転写して一本鎖cDNAを合成した。このcDNAを鋳型として, マウスGLUTi cDNAの361bpを規定するプライマーを用いてPCRをおこない, GLUT1mRNAの検出を試みた。GLUT1mRNA発現は, 2細胞期胚, 胞胚のいずれにおいても検出され, その発現は, 胞胚において増加している可能性が示された。以上より, マウス初期胚発育にともなう糖取り込み能の発達は, GLUT1の転写レベルにおける発現調節によることが示唆された。 |
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AbstractList | マウス初期胚は発育分化にともない, 糖取り込み能, 糖利用能が急速に増加し, 糖輸送担体 (GLUT1) 蛋白の発現増加が, その要因であることが明らかになってきている。今回, RT-PCR (reverse transcription-polymerase chain reaction) 法を用いることにより, 初期胚におけるGLUTl mRNAの解析を行った。マウス2細胞期胚, 胞胚のそれぞれ100個より, ミクロスピソカラムを用いてpolyA+RNAを抽出し, 逆転写して一本鎖cDNAを合成した。このcDNAを鋳型として, マウスGLUTi cDNAの361bpを規定するプライマーを用いてPCRをおこない, GLUT1mRNAの検出を試みた。GLUT1mRNA発現は, 2細胞期胚, 胞胚のいずれにおいても検出され, その発現は, 胞胚において増加している可能性が示された。以上より, マウス初期胚発育にともなう糖取り込み能の発達は, GLUT1の転写レベルにおける発現調節によることが示唆された。 |
Author | 片桐, 秀樹 森田, 豊 堤, 治 岡, 芳知 武谷, 雄二 |
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PublicationTitle | 哺乳動物卵子学会誌 |
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Publisher | 日本哺乳動物卵子学会 |
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References | 4) Khurana, N. K. and Wales, R. G.(1987): Effects of oestradiol and progesterone on the metabolism of [U-14C] glucose by mouse morulae and early blastocysts in vitro. J. Reprod. Fert., 79, 267-273. 12) Morita, Y., Tsutsumi, O., Hosoya, I., Taketani, Y., Oka, Y. and Kato, T.(1992): Expression and possible function of glucose transporter protein GLUT1 during preimplantation mouse development from oocytes to blastocysts. Biochem. Biophys. Res. Commun., 188, 8-15. 7) Barbehenn, E. K., Wales, R. G. and Lowry, O.H.(1974): The explanation for the blockade of glycolysis in eary mouse embryo. Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 71, 1056-1060. 2) Brinster, R. L.(1971): Oxidation of pyruvate and glucose by oocytes of the mouse and Rhesus monkey. J. Reprod. Fert., 24, 187-191. 3) Leese, H. J. and Barton, A. M.(1984): Pyruvate and glucose uptake by mouse ova and preimplantation embryos. J. Reprod. Fert., 72, 9-13. 10) Tsutsumi, O., Satoh, K., Taketani, Y. and Kato, T.(1992): Determination of enzyme activities of energy metabolism in the maturing rat oocyte. Mol.Reprod.Dev., 33, 333-337. 1) Brinster, R. L.(1965): Studies on the development of mouse embryos in vitro. II. The effect of energy source. J. Exp. Zool., 158, 59-68. 11) Hogan, A., Heyner, S., Charron, M.J., Copeland, N. G., Gilbert, D.J., Jenkins, N, A., Thorens, B. and Schultz, G.A.(1991): Glucose transporter gene expression in early mouse embryos. Development, 113, 363-372. 5) Brison, D.R. and Leese, H. J.(1991): Energy metabolism in late preimplantation rat embryos. J. Reprod. Fert., 93, 245-251. 8) De Schepper, G. G., Van Noorden, C. J. F. and Koperdraad, F.(1985): A cytochemical method for measuring enzyme activity in individual preovulatory mouse oocyte. J. Reprod. Fert., 74 709-716. 14) Giebelhaus, D. H., Heikkila, J. J. and Schultz, G. A.(1983): Changes in the quantity of histone and actin messenger RNA during the development of preimplantation mouse embryos. Dev. Biol., 98, 148-154. 9) Tsutsumi, O., Yano, T.,. Satoh, K., Mizuno, M. and Kato, T.(1990): Studies of hexokinase activity in human and mouse oocyte. Am. J. Obstet. Gynecol., 162, 1301-1304. 13) Tokunaga, K., Taniguchi, H., Yoda, K., Shimizu, M. and Sakiyama, S (1986): Nucleotide sequence of a full-length cDNA for mouse cytoskeletal β-actin mRNA. Nuc. Acids Res., 14, 2829. 6) Butler, J. E., Lechene Biggers, J. D (1988): Noninvasive measurement of glucose uptake by two population of murine embryos. Biol. Repod., 39, 779-786. |
References_xml | – reference: 4) Khurana, N. K. and Wales, R. G.(1987): Effects of oestradiol and progesterone on the metabolism of [U-14C] glucose by mouse morulae and early blastocysts in vitro. J. Reprod. Fert., 79, 267-273. – reference: 13) Tokunaga, K., Taniguchi, H., Yoda, K., Shimizu, M. and Sakiyama, S (1986): Nucleotide sequence of a full-length cDNA for mouse cytoskeletal β-actin mRNA. Nuc. Acids Res., 14, 2829. – reference: 2) Brinster, R. L.(1971): Oxidation of pyruvate and glucose by oocytes of the mouse and Rhesus monkey. J. Reprod. Fert., 24, 187-191. – reference: 12) Morita, Y., Tsutsumi, O., Hosoya, I., Taketani, Y., Oka, Y. and Kato, T.(1992): Expression and possible function of glucose transporter protein GLUT1 during preimplantation mouse development from oocytes to blastocysts. Biochem. Biophys. Res. Commun., 188, 8-15. – reference: 14) Giebelhaus, D. H., Heikkila, J. J. and Schultz, G. A.(1983): Changes in the quantity of histone and actin messenger RNA during the development of preimplantation mouse embryos. Dev. Biol., 98, 148-154. – reference: 7) Barbehenn, E. K., Wales, R. G. and Lowry, O.H.(1974): The explanation for the blockade of glycolysis in eary mouse embryo. Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 71, 1056-1060. – reference: 3) Leese, H. J. and Barton, A. M.(1984): Pyruvate and glucose uptake by mouse ova and preimplantation embryos. J. Reprod. Fert., 72, 9-13. – reference: 10) Tsutsumi, O., Satoh, K., Taketani, Y. and Kato, T.(1992): Determination of enzyme activities of energy metabolism in the maturing rat oocyte. Mol.Reprod.Dev., 33, 333-337. – reference: 8) De Schepper, G. G., Van Noorden, C. J. F. and Koperdraad, F.(1985): A cytochemical method for measuring enzyme activity in individual preovulatory mouse oocyte. J. Reprod. Fert., 74 709-716. – reference: 11) Hogan, A., Heyner, S., Charron, M.J., Copeland, N. G., Gilbert, D.J., Jenkins, N, A., Thorens, B. and Schultz, G.A.(1991): Glucose transporter gene expression in early mouse embryos. Development, 113, 363-372. – reference: 6) Butler, J. E., Lechene Biggers, J. D (1988): Noninvasive measurement of glucose uptake by two population of murine embryos. Biol. Repod., 39, 779-786. – reference: 5) Brison, D.R. and Leese, H. J.(1991): Energy metabolism in late preimplantation rat embryos. J. Reprod. Fert., 93, 245-251. – reference: 9) Tsutsumi, O., Yano, T.,. Satoh, K., Mizuno, M. and Kato, T.(1990): Studies of hexokinase activity in human and mouse oocyte. Am. J. Obstet. Gynecol., 162, 1301-1304. – reference: 1) Brinster, R. L.(1965): Studies on the development of mouse embryos in vitro. II. The effect of energy source. J. Exp. Zool., 158, 59-68. |
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