miR-199a-3p靶向视网膜母细胞瘤转录辅阻遏子1促进心肌细胞肥大

R329.21; [目的]探讨微小RNA microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)对心肌细胞肥大的调控作用及其作用靶基因.[方法]原代分离培养C57BL/6乳小鼠心肌细胞(NMVC),转染miR-199a-3p模拟物(mimic)和视网膜母细胞瘤转录辅阻遏子1(Rb-1)siRNA分别来增加NMVC中miR-199a-3p和抑制Rb-1的水平.双荧光素酶报告基因实验检测miR-199a-3p与潜在靶基因Rb-1 3'端非翻译区(3'-UTR)的结合作用.FITC-鬼笔环肽染色检测乳小鼠心肌细胞表面积.RT-qPCR和Western blot检测miR-19...

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Published inZhongshan da xue xue bao. Zhongshan daxue xuebao yixue kexue ban = Journal of Sun Yat-sen University. Yi xue ke xue ban Vol. 40; no. 1; pp. 23 - 30
Main Authors 杨静, 胡志琴, 朱杰宁, 李晖, 符永恒, 袁淑菁, 潘蓉, 张梦珍, 单志新
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 华南理工大学医学院,广东广州,510006%广东省人民医院//广东省医学科学院//广东省心血管病研究所,广东广州510080 2019
广东省人民医院//广东省医学科学院//广东省心血管病研究所,广东广州510080
南方医科大学药学院,广东广州510515%广东省人民医院//广东省医学科学院//广东省心血管病研究所,广东广州,510080%南方医科大学药学院,广东广州,510515%华南理工大学医学院,广东广州510006
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
Subjects
microRNA-199a-3p
微小RNA
心肌肥厚
视网膜母细胞瘤转录辅阻遏子1
微小RNA
视网膜母细胞瘤转录辅阻遏子1
心肌肥厚
microRNA-199a-3p
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ISSN1672-3554

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Abstract R329.21; [目的]探讨微小RNA microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)对心肌细胞肥大的调控作用及其作用靶基因.[方法]原代分离培养C57BL/6乳小鼠心肌细胞(NMVC),转染miR-199a-3p模拟物(mimic)和视网膜母细胞瘤转录辅阻遏子1(Rb-1)siRNA分别来增加NMVC中miR-199a-3p和抑制Rb-1的水平.双荧光素酶报告基因实验检测miR-199a-3p与潜在靶基因Rb-1 3'端非翻译区(3'-UTR)的结合作用.FITC-鬼笔环肽染色检测乳小鼠心肌细胞表面积.RT-qPCR和Western blot检测miR-199a-3p,Rb-1和心肌细胞肥大相关基因的表达.[结果]①过表达miR-199a-3p可明显增加NMVC中的肥厚相关基因Nppa,Acta1,Myh7表达;②双荧光素酶报告基因实验结果显示miR-199a-3p与Rb-1 3'UTR具有特异结合作用;miR-199a-3p可在转录后水平抑制Rb-1的表达;③过表达miR-199a-3p或抑制Rb-1表达均能一致性地增加心肌细胞表面积和心肌细胞肥大相关基因表达,并促进E2f2进入NMVC细胞核.[结论]miR-199a-3p通过抑制Rb-1表达,促进了E2f2进入细胞核来发挥促进NMVC肥大的作用.
AbstractList 【目的】探讨微小RNAmicroRNA-199a-3p（miR-199a-3p）对心肌细胞肥大的调控作用及其作用靶基因。【方法】原代分离培养C57BL/6乳小鼠心肌细胞（NMVC），转染miR-199a-3p模拟物（mimic）和视网膜母细胞瘤转录辅阻遏子1（Rb-1）siRNA分别来增加NMVC中miR-199a-3p和抑制Rb-1的水平。双荧光素酶报告基因实验检测miR-199a-3p与潜在靶基因Rb-13′端非翻译区（3′-UTR）的结合作用。FITC-鬼笔环肽染色检测乳小鼠心肌细胞表面积。RT-qPCR和Westernblot检测miR-199a-3p，Rb-1和心肌细胞肥大相关基因的表达。【结果】①过表达miR-199a-3p可明显增加NMVC中的肥厚相关基因Nppa，Acta1，Myh7表达；②双荧光素酶报告基因实验结果显示miR-199a-3p与Rb-13′UTR具有特异结合作用；miR-199a-3p可在转录后水平抑制Rb-1的表达；③过表达miR-199a-3p或抑制Rb-1表达均能一致性地增加心肌细胞表面积和心肌细胞肥大相关基因表达，并促进E2f2进入NMVC细胞核。【结论】miR-199a-3p通过抑制Rb-1表达，促进了E2f2进入细胞核来发挥促进NMVC肥大的作用。
R329.21; [目的]探讨微小RNA microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)对心肌细胞肥大的调控作用及其作用靶基因.[方法]原代分离培养C57BL/6乳小鼠心肌细胞(NMVC),转染miR-199a-3p模拟物(mimic)和视网膜母细胞瘤转录辅阻遏子1(Rb-1)siRNA分别来增加NMVC中miR-199a-3p和抑制Rb-1的水平.双荧光素酶报告基因实验检测miR-199a-3p与潜在靶基因Rb-1 3'端非翻译区(3'-UTR)的结合作用.FITC-鬼笔环肽染色检测乳小鼠心肌细胞表面积.RT-qPCR和Western blot检测miR-199a-3p,Rb-1和心肌细胞肥大相关基因的表达.[结果]①过表达miR-199a-3p可明显增加NMVC中的肥厚相关基因Nppa,Acta1,Myh7表达;②双荧光素酶报告基因实验结果显示miR-199a-3p与Rb-1 3'UTR具有特异结合作用;miR-199a-3p可在转录后水平抑制Rb-1的表达;③过表达miR-199a-3p或抑制Rb-1表达均能一致性地增加心肌细胞表面积和心肌细胞肥大相关基因表达,并促进E2f2进入NMVC细胞核.[结论]miR-199a-3p通过抑制Rb-1表达,促进了E2f2进入细胞核来发挥促进NMVC肥大的作用.
Author 胡志琴
朱杰宁
李晖
张梦珍
单志新
符永恒
杨静
袁淑菁
潘蓉
AuthorAffiliation 华南理工大学医学院,广东广州,510006%广东省人民医院//广东省医学科学院//广东省心血管病研究所,广东广州510080;南方医科大学药学院,广东广州510515%广东省人民医院//广东省医学科学院//广东省心血管病研究所,广东广州,510080%南方医科大学药学院,广东广州,510515%华南理工大学医学院,广东广州510006;广东省人民医院//广东省医学科学院//广东省心血管病研究所,广东广州510080
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YANG Jing
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Keywords 微小RNA
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