黑曲霉变种RM48 α-半乳糖苷酶的分离纯化及其酶学性质研究

经硫酸铵沉淀、疏水柱层析和分子筛层析，从黑曲霉变种RM48（Aspergillus niger v．Tiegh RM48）固体发酵后的浸提液中分离纯化了α-半乳糖苷酶．SDS-PAGE分析表明，此酶蛋白的分子量约为108 kDa．酶学性质研究表明，该酶的最适反应温度是60℃，耐热温度为40℃；最适反应pH为4．5，在pH3．0～6．0之间保持90％以上的酶活性；在实验的金属离子范围内，所有金属离子对黑曲霉变种RM48 α-半乳糖苷酶均有抑制作用，其中Cu^2＋和Fe^2-抑制作用最为显著，Li^2＋、Zn^2＋、Mn^2＋、K^＋、Na^＋、Ca^2-、Mg^2-和Co^2＋对酶活性有轻微的抑...

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Published inZhejiang daxue xue bao. Journal of Zhejiang University. Agriculture and life sciences. Nong ye yu sheng ming ke xue ban Vol. 35; no. 2; pp. 147 - 152
Main Author 许尧兴 李艳丽 柳永 许少春 姚晓红
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 浙江省农业科学院,植物保护与微生物研究所,浙江,杭州,310021 2009
Subjects
α-半乳糖苷酶
分离纯化
酶学性质
黑曲霉变种RM48
α-半乳糖苷酶
酶学性质
黑曲霉变种RM48
分离纯化
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ISSN1008-9209
DOI10.3785/j.issn.1008-9209.2009.02.005

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Summary:经硫酸铵沉淀、疏水柱层析和分子筛层析，从黑曲霉变种RM48（Aspergillus niger v．Tiegh RM48）固体发酵后的浸提液中分离纯化了α-半乳糖苷酶．SDS-PAGE分析表明，此酶蛋白的分子量约为108 kDa．酶学性质研究表明，该酶的最适反应温度是60℃，耐热温度为40℃；最适反应pH为4．5，在pH3．0～6．0之间保持90％以上的酶活性；在实验的金属离子范围内，所有金属离子对黑曲霉变种RM48 α-半乳糖苷酶均有抑制作用，其中Cu^2＋和Fe^2-抑制作用最为显著，Li^2＋、Zn^2＋、Mn^2＋、K^＋、Na^＋、Ca^2-、Mg^2-和Co^2＋对酶活性有轻微的抑制作用．在pH4．0和60℃反应条件下此酶的Km为7．37mmol·L^-1，Vmax为5618IU·mg^-1·min^-1．成熟酶蛋白N端序列为DEKAYSPCYY，与已报道的α-半乳糖苷酶蛋白无同源性.
Bibliography:enzymatic characterization
α-galactosidase
purification
33-1247/S
Aspergillus niger v. Tiegh RM48
Aspergillus niger v. Tiegh RM48 ; α-galactosidase; purification; enzymatic characterization
Q814
ISSN:1008-9209
DOI:10.3785/j.issn.1008-9209.2009.02.005